
細胞名稱
人子宮內(nèi)膜腺癌細胞;HEC-1-B說明書
形態(tài)特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是H. Kuramoto 1968年分離的HEC-1-A細胞亞株。不同於HEC-A-1的是:該亞株在培養(yǎng)第135天到190天之間表現(xiàn)出穩(wěn)定的生長周期,且重現(xiàn)扁平,與親本細胞系相比更具鋪路石式樣。 此外主要染色體組是親本細胞的兩倍。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yōu)質胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(131+5)
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
運輸和保存:
人子宮內(nèi)膜腺癌細胞;HEC-1-B說明書視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人子宮內(nèi)膜腺癌細胞;HEC-1-B說明書細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細胞復蘇后,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人子宮內(nèi)膜腺癌細胞;HEC-1-B說明書客戶造成細胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細胞狀態(tài)不好,未細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
細胞特性:
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數(shù)生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

Ghrelin 28 腦腸肽抗體 0.1ml
phospho-Cdc25B (Ser186) 磷酸化細胞分裂周期蛋白25B抗體 0.1ml
phospho-ATF2(Ser94) 磷酸化活化復制因子2抗體 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/RBITC 羅丹明標記的羊抗兔IgG 0.3ml
HIP2 泛素蛋白連接酶E2抗體 0.2ml
CKS2 細胞周期蛋白依賴性激酶調節(jié)亞基2抗體 0.2ml
Phospho-FADD(Ser191) 磷酸化Fas相關死亡結構域蛋白抗體 0.1ml
GRM2/GLUR2 促代謝型谷氨酸受體2抗體 0.1ml
phospho-EGFR (Ser1026) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
Phospho-Zyxin (Ser142/Ser143) 磷酸化斑聯(lián)蛋白抗體 0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 0.1ml
沒藥對照藥材 CAS 規(guī)格: 1g 訂購|咨詢
瑞舒伐他汀鈣 CAS 規(guī)格: 100mg 訂購|咨詢
醋戊曲酯 CAS 25161-41-5 規(guī)格: 10mg 訂購|咨詢
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人子宮內(nèi)膜腺癌細胞;HEC-1-B說明書白樺脂酸 CAS 472-15-1 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
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華基(97%) CAS 470-37-1 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
氫高烏甲素;Lappaconitin CAS 97792-45-5 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
金合歡素;刺槐素 CAS 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支; 訂購|咨詢
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