運(yùn)輸和保存:
人咽鱗癌細(xì)胞;FaDu圖片視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

細(xì)胞名稱
人咽鱗癌細(xì)胞;FaDu圖片
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 1968年從一位印度下咽骨腫瘤患者的鉆孔活組織切片中建立了FaDu細(xì)胞株。 在建立的細(xì)胞株中發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)中含有成束的細(xì)絲,并且細(xì)胞分界上的橋粒特別突出。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(116+5)
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:;CSF1PO:12;D13S317:8,9;D16S539:11;D18S51:16;D19S433:14,16;D21S11:31.2;D2S1338:19;D3S1358:17,18;D5S818:12;D7S820:11,12;D8S1179:13;FGA:25;TH01:8;TPOX:11;vWA:15,17
同工酶
染色體
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

ITGB1BP2/CHORDC3 整合素β1結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
Goat Anti-Mouse IgG/APC APC標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
SPARCL1/Ecm2 細(xì)胞外基質(zhì)蛋白2抗體 0.2ml
phospho-FANCD2(Ser222) 磷酸化FANCD2抗體 0.1ml
KDM1 組蛋白賴氨酸特異性脫甲基酶1抗體 0.1ml
HN protein 雞新城疫血凝素-神經(jīng)氨酸酶抗體 1ml
C1ORF111 1號(hào)染色體開放閱讀框111抗體 0.2ml
Neurturin 神經(jīng)生長因子抗體 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml
LRRC15 富含亮氨酸重復(fù)蛋白15抗體 0.2ml
GPR172B G蛋白偶聯(lián)受體172B抗體 0.2ml
蓮心堿;Liensinine CAS 2586-96-1 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
白鮮堿 CAS 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/支 訂購|咨詢
野麥畏;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 CAS 2303-17-5 規(guī)格: 0.1g 訂購|咨詢
木蝴蝶苷B; 木蝴蝶甙B CAS Oroxin B 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢
山麥冬皂苷B CAS 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
人咽鱗癌細(xì)胞;FaDu圖片紫杉醇 CAS 33069-62-4 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
紅景天 CAS 規(guī)格: 2.5g 訂購|咨詢
細(xì)辛脂素;(-)-asarinin CAS 133-04-0 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
右旋奎寧酸 CAS 77-95-2 規(guī)格: ≥98%,20mg/vial 訂購|咨詢
5,7-二羥基色原 CAS 31721-94-5 規(guī)格: 10mg 訂購|咨詢
竹紅菌乙素 CAS 123940-54-5 規(guī)格: HPLC≥97%;20mg 訂購|咨詢
甲氧芐啶 CAS 規(guī)格: 100mg 訂購|咨詢
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人咽鱗癌細(xì)胞;FaDu圖片細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人咽鱗癌細(xì)胞;FaDu圖片客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);