
細(xì)胞名稱
人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞;DLD-1說明書
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 DLD-1 是1977-1979年間D.L. Dexter和同事分離的兩株結(jié)直腸腺癌細(xì)胞株中的一株。 在ATCC和其它地方進(jìn)行的DNA fingerprinting和染色體組型分析表明這株細(xì)胞與HCT-15 (CCL-225)相似,說明這兩者是來自同一個(gè)人的不同克隆。 他們的遺傳起源可通過DNA fingerprinting證實(shí),但染色體組型分析顯示它們?nèi)狈θ旧w標(biāo)記一致改變或數(shù)目上一致改變。 細(xì)胞的CSAp陰性(CSAp-)。 DLD-1 細(xì)胞的 p53 抗原表達(dá)呈陽性(p53 抗原產(chǎn)生了一個(gè)C ->
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12;D13S317:8,11;D16S539:12,13;D18S51:11,17;D19S433:14,16;D21S11:29,32.2;D2S1338:17,25;D3S1358:17;D5S818:13;D7S820:10,12;D8S1179:15;FGA:22;TH01:7,9.3;TPOX:8,11;vWA:18,19
同工酶
染色體
運(yùn)輸和保存:
人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞;DLD-1說明書視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞;DLD-1說明書細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞;DLD-1說明書客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

Phospho-NDRG1 (Ser330) 磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體 0.2ml
KLHL7 kelch樣蛋白7抗體 0.2ml
LTBP4 轉(zhuǎn)化生長因子β結(jié)合蛋白4抗體 0.2ml
Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
Thymosin beta 4 胸腺素β4抗體 0.2ml
TTC33 TTC33蛋白抗體 0.2ml
MATH1 腸道分化干細(xì)胞MATH-1蛋白抗體 0.1ml
Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1021) 磷酸化血小板源性生長因子受體-B抗體 0.1ml
CTBP2 C末端結(jié)合蛋白2抗體 0.1ml
Cytosine deaminase 胞嘧啶脫氨酶抗體 0.2ml
Mouse Anti-Goat IgG/PE PE標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
桂 CAS 規(guī)格: 0.5g 訂購|咨詢
馬兜鈴內(nèi)酰胺 CAS 13395-02-3 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
槲皮素-7-O-BETA-D-吡喃葡萄糖 CAS 491-50-9 規(guī)格: HPLC≥98%,10mg/vial 訂購|咨詢
氧化小檗堿 CAS 549-21-3 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞;DLD-1說明書ISOPROPYLGALLATE(RG) CAS 規(guī)格: 1g 訂購|咨詢
扁豆堿;PhysostigMine CAS 57-47-6 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
水楊酸 CAS 69-72-7 規(guī)格: 50mg 訂購|咨詢
比洛芬 CAS 5104-49-4 規(guī)格: 50mg 訂購|咨詢
敵草快;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 CAS 6385-62-2 規(guī)格: 0.1g 訂購|咨詢
黃芩素;Baicalein CAS 491-67-8 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
小檗堿; Berberine hyd CAS 633-65-8 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
溴化十六烷基三瓊脂對照培養(yǎng)基 CAS 規(guī)格: 13.6g /300mL,20袋/盒 訂購|咨詢