細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

caspase-8 subunit p18  半胱氨酸蛋白酶8抗體 0.2ml
TRIM7/RNF90  糖原生成素相互作用蛋白抗體 0.2ml
LGI4  含亮氨酸神經膠質瘤失活蛋白4抗體 0.1ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-Cy7  PE-Cy7標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
Phospho-NFKB p65(Ser468)  磷酸化細胞核因子NF-κB p65抗體 0.1ml
RPS6KA1/p90RSK/RSK1  絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體 0.1ml
DOK2  D酪氨酸激酶衰減蛋白2抗體 0.1ml
CD56/NCAM1  神經細胞粘附分子1抗體 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgG/Cy7  Cy7標記的兔抗馬IgG 0.1ml
TSPAN20/UPIb  四分子交聯體20抗體（四旋蛋白） 0.2ml
BTNL9  嗜乳脂蛋白樣9抗體 0.2ml
別隱品堿 CAS 485-91-6 規格： 20mg 訂購|咨詢
去氫二異丁香酚 CAS  規格： 20mg 訂購|咨詢
三梔子甙甲酯 CAS 64421-28-9 規格： HPLC≥98%，20mg/vial 訂購|咨詢
木犀草素 CAS 491-70-3 規格： 20mg 訂購|咨詢
人組織細胞淋巴瘤細胞；U937 [U-937]培養琥珀酸 CAS 110-15-6 規格： 200mg 訂購|咨詢
黃連素 CAS 633-65-8 規格： HPLC≥98%，20mg/vial 訂購|咨詢
β，β’-二甲基酰阿卡寧 CAS 34539-65-6 規格： 20mg 訂購|咨詢
己唑醇;純品型;標準品;;有證書 CAS 79983-71-4 規格： 0.1g 訂購|咨詢
酸藤子酚 CAS 550-24-3 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
水仙苷;Narcissoside CAS 604-80-8 規格： 20mg 訂購|咨詢
柴胡皂苷B2 CAS 58316-41-9 規格： 20mg 訂購|咨詢
1,2,3,4,6-O-五沒食子酰葡萄 CAS 14937-32-7 規格： 20mg 訂購|咨詢

第一種：

是凍存產品，由液氮直接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態影響較大，一旦細胞狀態不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。

第二種：

是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。

質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。

購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的細胞名稱、種屬、貨號、數量、協商細胞價格并預約發貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。