細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

V.cholera Ogawa  01群小川型霍亂弧菌抗體 0.2ml
C12ORF63  12號染色體開放閱讀框63抗體 0.2ml
Proteasome 20S alpha 1+2+3+5+6+7  蛋白酶體PSMα1+2+3+5+6+7抗體 0.2ml
ITK/PSCTK2  IL-2誘導型T細胞激酶抗體 0.2ml
CPB2/Carboxypeptidase B2  胰羧肽酶B2抗體 0.2ml
PAGE1  前列腺相關P抗原家族成員1抗體 0.2ml
TCF7L2  轉錄因子7類似物2抗體 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的兔抗小鼠IgM 0.1ml
CCR-2B  細胞表面趨化因子受體2B抗體 0.1ml
Phospho-BRCA1(Ser1423)  磷酸化乳腺癌易感基因1抗體 0.1ml
IL-20  白細胞介素-20抗體 0.1ml
二氫歐山芹醇當歸酸酯 CAS 5058-13-9 規格： 20mg 訂購|咨詢
大黃酚-8-O-葡萄糖苷 CAS 13241-28-6 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
新藤黃酸 CAS  規格： 20mg 訂購|咨詢
蒜氨酸 CAS 556-27-4 規格： 20mg 訂購|咨詢
比枯枯靈 CAS 485-49-4 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
3,4,5-三 CAS  規格： 50mg 訂購|咨詢
人結直腸腺癌細胞；SW480 [SW-480]培養肌苷 CAS 58-63-9 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
氨磺必利 CAS  規格：  訂購|咨詢
白術內酯Ⅰ;Atractylelid CAS 73069-13-3 規格： 20mg 訂購|咨詢
貝母堿 CAS 61825-98-7 規格： 20mg 訂購|咨詢
林 CAS  規格：  訂購|咨詢
脫氧核糖鳥嘌呤核苷酸鈉 CAS  規格： 20mg/支 訂購|咨詢

第一種：

是凍存產品，由液氮直接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態影響較大，一旦細胞狀態不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。

第二種：

是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。

質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。

購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的細胞名稱、種屬、貨號、數量、協商細胞價格并預約發貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。