
細(xì)胞名稱
人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞;MEG-01說明書
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 MEG-01細(xì)胞株源自一位CML患者成巨核細(xì)胞轉(zhuǎn)換期的骨髓細(xì)胞。 細(xì)胞質(zhì)因子VIII和表面球蛋白IIb/IIIa,高碘酸-Schiff(PAS)反應(yīng),α醋酸萘酯酶和酸性磷酸酶陽(yáng)性。 髓過氧化物酶,α丁酸萘酯酶,氯化醋酸AS-D萘苯酚酯酶和堿性磷酸酶陰性。 用單克隆抗體BA-1(抗B細(xì)胞,粒性白細(xì)胞),HPL-3(抗球蛋白IIb/IIIa)和20.3(抗單核細(xì)胞,血小板)染色成陽(yáng)性。 其他淋巴和骨髓類抗體成陰性。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
運(yùn)輸和保存:
人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞;MEG-01說明書視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞;MEG-01說明書細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞;MEG-01說明書客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長(zhǎng),-80度過夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

phospho-MARK4(Ser423) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MARK4抗體 0.1ml
GADD45 生長(zhǎng)抑制DNA損傷基因45抗體 0.1ml
IL-16 白介素16抗體 0.1ml
FAM98A FAM98A蛋白抗體 0.2ml
SLC2A4RG/GLUT4 enhancer factor 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4增強(qiáng)因子抗體 0.2ml
Shadow/shadow of prion protein(CT) 新朊蛋白抗體(C端) 0.2ml
AP-TNAP/ALPL 堿性磷酸酶抗體 0.1ml
LDOC1/BCUR1 癌癥亮氨酸拉鏈下調(diào)因子1抗體 0.2ml
c-Maf 原癌基因cMAF抗體 0.1ml
BNIP3L 促凋亡BNIP3L蛋白抗體 0.2ml
CCL16/HCC-4 巨噬細(xì)胞炎性蛋白16抗體 0.2ml
烏金甙; CAS 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
磺胺吡嗪鈉 對(duì)照品 CAS 規(guī)格: 200mg 訂購(gòu)|咨詢
辛弗林(94-07-5) CAS 34520 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
五味子醇乙 CAS 58546-54-6 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞;MEG-01說明書正 CAS 規(guī)格: 50mg 訂購(gòu)|咨詢
寶藿苷Ⅰ;baohuoside I CAS 113558-15-9 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
羥基積雪草苷 CAS 34540-22-2 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 訂購(gòu)|咨詢
異綠原酸C CAS 32451-88-0 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
胡黃連苷I CAS 27409-30-9 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
茯苓總酸(鑒別用) CAS 29070-92-6 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
苯;Benzoic acid CAS 65-85-0 規(guī)格: 50mg 訂購(gòu)|咨詢
雙威;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 CAS 59669-26-0 規(guī)格: 0.1g 訂購(gòu)|咨詢