運(yùn)輸和保存:
人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;6T-CEM圖片視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

細(xì)胞名稱
人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;6T-CEM圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞
生長特性 懸浮生長
特征特性 這是一個(gè)CCRF-CEM的6-硫鳥嘌呤抗性變種。 HPRT, HGPRT缺陷并能分泌高滴度的免疫抑制因子。 通常用作T細(xì)胞雜交瘤的融合對象。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法 1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,11;D13S317:11,12;D16S539:10,13;D18S51:13,18;D19S433:14,15;D21S11:31,33.2;D2S1338:24;D3S1358:14,15;D5S818:11,13;D7S820:9,14;D8S1179:13;FGA:23,24TH01:6,7;TPOX:8;vWA:17,19
同工酶
染色體
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

LOXL4 賴氨酰氧化酶樣蛋白4抗體 0.2ml
CCL4/MIP-1 Beta 巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β抗體 0.1ml
Phospho-NMDAR2A/NR2A (Tyr1246) 磷酸化谷氨酸受體2A抗體 0.1ml
MARCH1 膜相關(guān)環(huán)指蛋白1抗體 0.2ml
CTDSPL2 CTDSPL2蛋白抗體 0.2ml
Rabbit Anti-Bovine IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗牛IgM 0.3ml
Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 0.1ml
Influenza A virus (Duck) 鴨流感病毒抗體 0.2ml
GFR Alpha-1 GDNF家族受體α-1抗體 0.1ml
RBBP5 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白5抗體 0.2ml
HCN3 鉀/鈉超極化激活環(huán)核苷酸門控通道蛋白3抗體 0.2ml
紫菀 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
墨旱蓮 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
瓦松 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;6T-CEM圖片相思子 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
干皮 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
狼毒(月腺大戟) 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
湖北貝母 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
仙鶴草 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
千里光 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
沒藥(天然沒藥) 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;6T-CEM圖片細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;6T-CEM圖片客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);