
細(xì)胞名稱
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-673 [A673]說明書
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 A-673是源自15歲女性的橫紋肌肉瘤。 它在軟瓊脂上形成克隆,在免疫抑制血清處理的小鼠中成瘤。 有四個以上的標(biāo)志染色體,一個額外的F染色體和兩個異常的B染色體。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:8,13;D16S539:11;D18S51:13,16;D19S433:13,14;D21S11:29,30.2;D2S1338:16,21;D3S1358:14;D5S818:11,12;D7S820:10,12;D8S1179:11,13;FGA:19,20;TH01:9.3;TPOX:8;vWA:15,18
同工酶
染色體
運輸和保存:
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-673 [A673]說明書視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-673 [A673]說明書細(xì)胞運輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-673 [A673]說明書客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

Neurotrimin/HNT 神經(jīng)營養(yǎng)因子HNT抗體 0.2ml
Donkey Anti-rabbit IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml
phospho-VAV1(Tyr160) 磷酸化鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體 0.1ml
phospho-AMPK alpha-1(Ser485+Ser491) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體 0.1ml
Paxillin 樁蛋白Paxillin抗體 0.1ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
Dnmt3a DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3α抗體 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgM/PE PE標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 0.1ml
Donkey Anti-human IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml
ARL8B ADP核糖基化樣因子8B抗體 0.2ml
HDHD2B/LHPP HDHD2B蛋白抗體 0.2ml
紫蘇葉 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
檳榔 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
薄荷 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-673 [A673]說明書人參 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
木香 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
川芎 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
馬兜鈴 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
丹參 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
五味子(北五味子) 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
平貝母 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別