運輸和保存:
人胰腺癌細胞;AsPC-1圖片視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

細胞名稱
人胰腺癌細胞;AsPC-1圖片
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 一個胰腺癌病人的腹水中的細胞移植到裸鼠后建立了這個細胞株。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,13;D13S317:9,12;D16S539:11;D18S51:18;D19S433:14;D21S11:28,30;D2S1338:22,23;D3S1358:16;D5S818:12;D7S820:12,13;D8S1179:13,15;FGA:24;TH01:7,9.3;TPOX:8,10;vWA:17
同工酶
染色體
細胞特性:
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數(shù)生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

phospho-SHC(Tyr239/240) 磷酸化SH2結構域轉化蛋白1抗體 0.1ml
DCTN3 動力蛋白激活蛋白亞基3抗體 0.2ml
FASTKD1 Fas活化激酶結構域蛋白1抗體 0.2ml
Urocortin 尿皮質素抗體 0.2ml
ENPP1 核苷酸內焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗體 0.1ml
Cdc25A 細胞分裂周期蛋白25抗體 0.1ml
RKIP/PBP 磷脂酰結合蛋白1抗體 0.1ml
SMURF2 Smad蛋白E3泛素連接酶2抗體 0.2ml
FBXL17 FBXL17蛋白抗體 0.2ml
Septin 3 神經元特異性蛋白3抗體 0.2ml
GKRP 葡萄糖激酶調節(jié)蛋白抗體 0.2ml
紫杉醇 英文名稱 Paclitaxel 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: HPLC≥98%
梔子苷(京尼平苷) 英文名稱 Geniposide 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: HPLC≥98%
大麥芽堿 英文名稱 Hordenine 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: HPLC≥95%
厚樸酚 英文名稱 Magnolol 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: HPLC≥98%
人胰腺癌細胞;AsPC-1圖片番瀉苷B 英文名稱 Sennoside B 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: HPLC≥99%
和厚樸酚 英文名稱 Honokiol 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: HPLC≥98%
番瀉苷A 英文名稱 Sennoside A 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: HPLC≥98%
番瀉苷D 英文名稱 Sennoside D 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: HPLC≥98%
番瀉苷C 英文名稱 Sennoside C 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: HPLC≥98%
紫草素 英文名稱 Shikonin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: HPLC≥99%
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人胰腺癌細胞;AsPC-1圖片細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細胞復蘇后,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人胰腺癌細胞;AsPC-1圖片客戶造成細胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細胞狀態(tài)不好,未細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細胞培養(yǎng)時經其它處理的,不重發(fā);
(5)細胞收到2天內,未告知,不重發(fā);