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![人結(jié)直腸腺癌細胞；HCT-8 [HRT-18]圖片](http://m.xhtechnology.cn/img2019/4374300.jpg "人結(jié)直腸腺癌細胞；HCT-8 [HRT-18]圖片") |
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運輸和保存：
人結(jié)直腸腺癌細胞；HCT-8 [HRT-18]圖片視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復(fù)蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
細胞名稱 人結(jié)直腸腺癌細胞；HCT-8 [HRT-18]圖片
形態(tài)特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 HCT-8與HRT-18是一樣的。 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X,Y；CSF1PO:12；D13S317:8,11；D16S539:12,13；D18S51:11,17；D19S433:14,16；D21S11:29,32.2；D2S1338:17,25；D3S1358:17；D5S818:13；D7S820:10,11.3；D8S1179:15；FGA:22；TH01:7,9.3；TPOX:8,11；vWA:18,19
同工酶
染色體
細胞特性：細胞名稱 人結(jié)直腸腺癌細胞；HCT-8 [HRT-18]圖片形態(tài)特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 HCT-8與HRT-18是一樣的。 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X,Y；CSF1PO:12；D13S317:8,11；D16S539:12,13；D18S51:11,17；D19S433:14,16；D21S11:29,32.2；D2S1338:17,25；D3S1358:17；D5S818:13；D7S820:10,11.3；D8S1179:15；FGA:22；TH01:7,9.3；TPOX:8,11；vWA:18,19
同工酶
染色體
1)】人結(jié)直腸腺癌細胞；HCT-8 [HRT-18]圖片組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定：細胞角蛋白-18(CK-18)免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
注意事項：
（1）凍存前細胞狀態(tài)，細胞最好在對數(shù)生長期，細胞密度適合，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；
（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。
（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。
（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。
（5）關(guān)于“慢凍”，傳統(tǒng)的方法，LLC細胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。
ANKRD40 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體 0.2ml
Cystatin D 胱抑素D/半胱氨酸蛋白酶抑制劑D抗體 0.2ml
Mouse Anti-Guinea pig IgG/APC APC標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
IRAK1 白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體 0.1ml
TRIM6/RNF89 環(huán)指蛋白89 0.2ml
phospho-Filamin A/FLNA (Ser2151) 磷酸化細絲蛋白A抗體 0.1ml
LAMR1 層粘連蛋白受體1抗體（N端） 0.1ml
Substance P Receptor/NK1R P物質(zhì)受體抗體 0.1ml
Transglutaminase 2/TGase2 轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶2抗體 0.2ml
TXNRD1 硫氧環(huán)蛋白還原酶1抗體 0.2ml
HIPK4 同源相互作用蛋白激酶4抗體 0.2ml
重樓皂甙C 英文名稱 Polyphyllin C 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
重樓皂甙E 英文名稱 Polyphyllin E 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
重樓皂甙F 英文名稱 Polyphyllin F 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
烏金甙 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
人結(jié)直腸腺癌細胞；HCT-8 [HRT-18]圖片石杉堿甲 英文名稱 Huperzine-A 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
獐牙菜甙 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
豆腐果甙 英文名稱 Helicid 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
告達亭甙元 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
川陳皮素 英文名稱 Nobiletin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
青陽參甙元A 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
Cystatin D 胱抑素D/半胱氨酸蛋白酶抑制劑D抗體 0.2ml
Mouse Anti-Guinea pig IgG/APC APC標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
IRAK1 白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體 0.1ml
TRIM6/RNF89 環(huán)指蛋白89 0.2ml
phospho-Filamin A/FLNA (Ser2151) 磷酸化細絲蛋白A抗體 0.1ml
LAMR1 層粘連蛋白受體1抗體（N端） 0.1ml
Substance P Receptor/NK1R P物質(zhì)受體抗體 0.1ml
Transglutaminase 2/TGase2 轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶2抗體 0.2ml
TXNRD1 硫氧環(huán)蛋白還原酶1抗體 0.2ml
HIPK4 同源相互作用蛋白激酶4抗體 0.2ml
重樓皂甙C 英文名稱 Polyphyllin C 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
重樓皂甙E 英文名稱 Polyphyllin E 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
重樓皂甙F 英文名稱 Polyphyllin F 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
烏金甙 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
人結(jié)直腸腺癌細胞；HCT-8 [HRT-18]圖片石杉堿甲 英文名稱 Huperzine-A 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
獐牙菜甙 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
豆腐果甙 英文名稱 Helicid 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
告達亭甙元 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
川陳皮素 英文名稱 Nobiletin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
青陽參甙元A 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
可以重發(fā)的情況有哪些？
（1）人結(jié)直腸腺癌細胞；HCT-8 [HRT-18]圖片細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；
（2）凍存的細胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細胞未存活，重發(fā)；
（3）存活的細胞靜置24小時后，絕大多數(shù)細胞未存活，重發(fā)；
（4）凍存的細胞復(fù)蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
（5）視具體情況而定。
出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）人結(jié)直腸腺癌細胞；HCT-8 [HRT-18]圖片客戶造成細胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）細胞狀態(tài)不好，未細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（4）細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（5）細胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
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