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![人結(jié)直腸腺癌細胞；LS 174T [LS174T]圖片](http://m.xhtechnology.cn/img2019/4374286.jpg "人結(jié)直腸腺癌細胞；LS 174T [LS174T]圖片") |
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運輸和保存：
人結(jié)直腸腺癌細胞；LS 174T [LS174T]圖片視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復(fù)蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
細胞名稱 人結(jié)直腸腺癌細胞；LS 174T [LS174T]圖片
形態(tài)特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 LS 174T是LS 180 (ATCC CL 187)結(jié)腸腺癌細胞株的胰蛋白酶化變種。 它比親本更易傳代，象LS 180一樣生成大量的癌胚抗原(CEA)。 電鏡研究表明有豐富的微絲和細胞質(zhì)粘液素液泡。 直腸抗原3陽性。 p53抗原表達陰性，但mRNA表達陽性。 與ATCC CL-187來源于同一個腫瘤。LS 174T細胞角蛋白染色陽性。 癌基因c-myc, N-myc, H-ras, N-ras, Myb, 和 fos的表達呈陽性。 癌基因k-ras和sis的表達未做檢測。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X；CSF1PO:10,13；D13S317:10；D16S539:11,13；D18S51:11,13,14；D19S433:14,15；D21S11:29,31；D2S1338:18,22；D3S1358:15,16,17；D5S818:11,16；D7S820:10.3,11；D8S1179:12,16；FGA:21,22；TH01:6,7；TPOX:8,9；vWA:15,17
同工酶
染色體
細胞特性：細胞名稱 人結(jié)直腸腺癌細胞；LS 174T [LS174T]圖片形態(tài)特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 LS 174T是LS 180 (ATCC CL 187)結(jié)腸腺癌細胞株的胰蛋白酶化變種。 它比親本更易傳代，象LS 180一樣生成大量的癌胚抗原(CEA)。 電鏡研究表明有豐富的微絲和細胞質(zhì)粘液素液泡。 直腸抗原3陽性。 p53抗原表達陰性，但mRNA表達陽性。 與ATCC CL-187來源于同一個腫瘤。LS 174T細胞角蛋白染色陽性。 癌基因c-myc, N-myc, H-ras, N-ras, Myb, 和 fos的表達呈陽性。 癌基因k-ras和sis的表達未做檢測。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X；CSF1PO:10,13；D13S317:10；D16S539:11,13；D18S51:11,13,14；D19S433:14,15；D21S11:29,31；D2S1338:18,22；D3S1358:15,16,17；D5S818:11,16；D7S820:10.3,11；D8S1179:12,16；FGA:21,22；TH01:6,7；TPOX:8,9；vWA:15,17
同工酶
染色體
1)】人結(jié)直腸腺癌細胞；LS 174T [LS174T]圖片組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定：細胞角蛋白-18(CK-18)免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
注意事項：
（1）凍存前細胞狀態(tài)，細胞最好在對數(shù)生長期，細胞密度適合，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；
（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。
（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。
（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。
（5）關(guān)于“慢凍”，傳統(tǒng)的方法，LLC細胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。
phospho-SIRT6(Ser338) 磷酸化沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6抗體 0.1ml
CSPP1 中心體和紡錘體極相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
CCDC83 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白83抗體 0.2ml
HBEX2/Bex1 腦組織表達X連鎖蛋白1抗體 0.2ml
phospho-HDAC6 (Ser22) 磷酸化組蛋白去乙酰化酶6抗體 0.1ml
AANAT 芳香胺N-乙酰化轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml
Crk p38 /CRK Crk p38抗體 0.2ml
SUZ12/CHET9 胚胎干細胞抑制蛋白Suz12抗體 0.2ml
ANKRD50 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體 0.2ml
ASB4 含錨蛋白重復(fù)序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族4抗體 0.2ml
phospho-GSK3 Alpha(Ser21) 磷酸化葡萄糖合成激酶-3α抗體 0.1ml
澤瀉 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
穿心蓮 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
棉花根 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
人結(jié)直腸腺癌細胞；LS 174T [LS174T]圖片藏菖蒲 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
地骨皮 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
芫花條 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
雞蛋花 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
金蓮花 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
山芝麻 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
土木香 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
CSPP1 中心體和紡錘體極相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
CCDC83 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白83抗體 0.2ml
HBEX2/Bex1 腦組織表達X連鎖蛋白1抗體 0.2ml
phospho-HDAC6 (Ser22) 磷酸化組蛋白去乙酰化酶6抗體 0.1ml
AANAT 芳香胺N-乙酰化轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml
Crk p38 /CRK Crk p38抗體 0.2ml
SUZ12/CHET9 胚胎干細胞抑制蛋白Suz12抗體 0.2ml
ANKRD50 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體 0.2ml
ASB4 含錨蛋白重復(fù)序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族4抗體 0.2ml
phospho-GSK3 Alpha(Ser21) 磷酸化葡萄糖合成激酶-3α抗體 0.1ml
澤瀉 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
穿心蓮 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
棉花根 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
人結(jié)直腸腺癌細胞；LS 174T [LS174T]圖片藏菖蒲 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
地骨皮 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
芫花條 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
雞蛋花 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
金蓮花 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
山芝麻 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
土木香 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別
可以重發(fā)的情況有哪些？
（1）人結(jié)直腸腺癌細胞；LS 174T [LS174T]圖片細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；
（2）凍存的細胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細胞未存活，重發(fā)；
（3）存活的細胞靜置24小時后，絕大多數(shù)細胞未存活，重發(fā)；
（4）凍存的細胞復(fù)蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
（5）視具體情況而定。
出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）人結(jié)直腸腺癌細胞；LS 174T [LS174T]圖片客戶造成細胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）細胞狀態(tài)不好，未細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（4）細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（5）細胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
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