運(yùn)輸和保存:
人食管癌細(xì)胞;Eca-109 [Eca109]圖片視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

細(xì)胞名稱
人食管癌細(xì)胞;Eca-109 [Eca109]圖片
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 1973年建系,來自人食管中段鱗癌組織,小塊法原代培養(yǎng)建系。BALB/c裸鼠移植成瘤。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:9,10;D13S317:12,13.3;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13,14;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D7S820:8,12;D8S1179:12,13;FGA:21;TH01:7;TPOX:8,12;vWA:16,18
同工酶
染色體
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

TRPV1/VR1 辣椒素受體抗體 0.1ml
Sortilin/NTR3/Gp95 神經(jīng)降壓素受體3抗體(糖蛋白95) 0.2ml
TASK 3/KCNK9 酸敏感性鉀離子通道蛋白抗體 0.2ml
Patched/PTCH Patched/PTCH抗體 0.1ml
Pancreatic Lipase 胰脂肪酶抗體 0.1ml
ITIH4 α胰蛋白酶重鏈H4抗體 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml
FAM46C FAM46C蛋白抗體 0.2ml
stabilin1/STAB 1 淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞受體1抗體 0.2ml
PCK2 磷酸羧化酶2抗體 0.2ml
PHD3 脯氨酸羥化酶抗體 0.2ml
原花青素B3 英文名稱 Procyanidin B3 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥90%
原人參二醇(PPD) 英文名稱 Protopanaxdiol 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥95%
原人參三醇(PPT) 英文名稱 PROTOPANAXATRIOL 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
原薯蕷皂苷 英文名稱 Protodioscin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
人食管癌細(xì)胞;Eca-109 [Eca109]圖片遠(yuǎn)志山酮III 英文名稱 Polygalaxanthone III 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥97%
原蘇木素B 英文名稱 Protosappanin B 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥97%
原偽金絲桃素 英文名稱 Protopseudohypericin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥95%
遠(yuǎn)志皂苷元 英文名稱 Senegenin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥96%
遠(yuǎn)志酸 英文名稱 Polygalacic Acid 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥97%
蕓香柚皮苷 英文名稱 Narirutin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人食管癌細(xì)胞;Eca-109 [Eca109]圖片細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人食管癌細(xì)胞;Eca-109 [Eca109]圖片客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);