
細胞名稱
人肝癌細胞;BEL-7405說明書
形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
運輸和保存:
人肝癌細胞;BEL-7405說明書視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人肝癌細胞;BEL-7405說明書細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細胞復蘇后,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人肝癌細胞;BEL-7405說明書客戶造成細胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細胞狀態(tài)不好,未細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細胞收到2天內,未告知,不重發(fā);
細胞特性:
1)】人肝癌細胞;BEL-7405說明書組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞角蛋白-18(CK-18)免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數(shù)生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

Acetyl-Histone H4(K16) 乙;M蛋白H4(K16)抗體 0.1ml
EAAT3 膠質細胞谷氨酸運載蛋白3抗體(神經(jīng)/上皮細胞谷氨酸運載蛋白) 0.1ml
HBV pre S1/S2 protein 人乙肝病毒pre S1/S2蛋白抗體 0.1ml
C12ORF68 12號染色體開放閱讀框68抗體 0.2ml
phospho-Proteasome 20S beta 7(Ser214) 磷酸化蛋白酶體PSMβ7抗體 0.2ml
SIP1/ZEB-2 運動神經(jīng)元存活蛋白結合蛋白1抗體 0.1ml
Fibrinopeptide A 纖維蛋白肽A/血纖肽抗體 0.2ml
PAI1/PLANH1/Serpine 1 內皮細胞纖溶酶原激活抑制蛋白1抗體 0.2ml
GAD67 谷氨酸脫羧酶-67抗體 0.1ml
MAP3K5/ASK1/MEKK5 細胞凋亡信號調節(jié)激酶1抗體 0.1ml
Cytochrome B/MT-CYB 細胞色素B抗體 0.2ml
育亨賓 英文名稱 Yohimbine 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥97%
鳶尾苷元磺酸鈉 英文名稱 Tectorigenin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥98%
人肝癌細胞;BEL-7405說明書鳶尾黃素 英文名稱 Tectorigenin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥97%
原花青素 英文名稱 Procyanidin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥98%
原人參二醇(PPD) 英文名稱 Protopanaxadiol 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥95%
原花青素B2 英文名稱 Procyanidin B2 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥98%
原花青素B3 英文名稱 Procyanidin B3 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥98%
原薯蕷皂苷 英文名稱 Protodioscin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥98%
原人參三醇(PPT) 英文名稱 Protopanaxatriol 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥98%
遠志酸 英文名稱 Polygalacic acid 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥97%