
細(xì)胞名稱
人肺腺癌細(xì)胞;SPC-A-1說明書
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 這株細(xì)胞源自一位男性肺腺癌患者。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:9,10;D13S317:12,13.3;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13,14;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D7S820:8,12;D8S1179:12;FGA:21;TH01:7;TPOX:8,12;vWA:16,18
同工酶
染色體
運(yùn)輸和保存:
人肺腺癌細(xì)胞;SPC-A-1說明書視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人肺腺癌細(xì)胞;SPC-A-1說明書細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人肺腺癌細(xì)胞;SPC-A-1說明書客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

Mouse Anti-Rabbit IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 2ml
HHV8/ORF K14 人類皰疹病毒8 ORF14抗體 0.2ml
CSP 環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗體 1ml
phospho-STXBP1(Ser515) 磷酸化神經(jīng)突觸前膜胞內(nèi)蛋白抗體 0.1ml
NKR/Neurokin B receptor 神經(jīng)激肽B受體抗體 0.2ml
PAI-2/SerpinB2 纖溶酶原激活物抑制因子2抗體(血漿酶原激活酶抑制因子-2) 0.1ml
CCDC12 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體 0.2ml
Rabbit Anti-Avidin/FITC FITC標(biāo)記的兔抗親和素 0.1ml
NRG1/HRG beta 1 乳腺癌細(xì)胞分化因子P45抗體 Heregulinβ 0.1ml
phospho-eIF4EBP1(Thr37/46) 磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
phospho-MEF2C(Ser59) 磷酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2C抗體 0.1ml
銀杏內(nèi)酯J 英文名稱 Ginkgolide J 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥99%
銀杏酸(C13:0) 英文名稱 Ginkgolic Acid (C13:0) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
銀杏酸(C17:1) 英文名稱 Ginkgolic Acid (C17:1) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥99%
吲哚醇 英文名稱 Indolol 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
人肺腺癌細(xì)胞;SPC-A-1說明書柚皮素 英文名稱 Naringenin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
隱綠原酸/4-咖啡酰奎寧酸 英文名稱 4-Dicaffeoylquinic Acid 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥97%
柚皮甙二氫查爾酮 英文名稱 Naringin dihydrochalcone 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
右旋四氫巴馬汀 英文名稱 d-Tetrahydropalmatine 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
右旋比扣扣靈堿 英文名稱 d-Bicuculline 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
羽扇豆醇 英文名稱 Lupeol 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥98%