
細(xì)胞名稱
人類原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞;UT-7培養(yǎng)
形態(tài)特性 圓形
生長特性 懸浮生長,有1%~2%的細(xì)胞可輕微貼壁。
特征特性 該細(xì)胞于1988年建系;源于一名64歲患有急性粒細(xì)胞白血病(AML M7)的男性的骨髓;對多種細(xì)胞因子有反應(yīng)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;5-7u/ml Epo
傳代方法 維持細(xì)胞濃度在1.0~1.5×106 cells/ml,1:2傳代,2~3天1次。
傳代情況 C7
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12;D13S317:8;D16S539:10,12;D18S51:14,17;D19S433:14,14.2;D21S11:31.2;D2S1338:18,23;D3S1358:16;D5S818:12;D7S820:8;D8S1179:11,15;FGA:23;TH01:6,9;TPOX:10;vWA:14,18,19;
同工酶
染色體
運輸和保存:
人類原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞;UT-7培養(yǎng)視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人類原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞;UT-7培養(yǎng)細(xì)胞運輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人類原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞;UT-7培養(yǎng)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

factor XIII 凝血因子13抗體(纖維蛋白穩(wěn)定因子) 0.2ml
phospho CSF1R (Tyr699) 磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 0.1ml
CREB-H/CREB3L3 環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白H抗體 0.2ml
C20orf43 20號染色體開放閱讀框43抗體 0.1ml
Rabbit Anti-Goat IgG 兔抗羊IgG 1mg
BEX4 腦表達(dá)X連鎖蛋白4抗體 0.2ml
CENPT 著絲粒蛋白T抗體 0.2ml
KLK1 激肽釋放酶1抗體 0.1ml
Matriptase 蛋白裂解酶(一種新的癌基因)抗體 0.1ml
Jagged1/CD339 Jagged1/CD339抗體 0.1ml
ATF3 活化轉(zhuǎn)錄因子3抗體 0.2ml
頭孢他啶 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
多西環(huán)素 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
克林霉素磷酸酯 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
土霉素 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
人類原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞;UT-7培養(yǎng)青霉素V 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
鹽酸四環(huán)素 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
鹽酸金霉素 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
頭孢呋辛酯 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
舒他西林 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
頭孢呋辛 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: