細(xì)胞名稱(chēng) SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞；293T培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 表達(dá)SV40大T抗原，可用于轉(zhuǎn)染和作為包裝細(xì)胞；用于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染時(shí)可高表達(dá)AP融合蛋白。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:4~8傳代；26~36小時(shí)1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR Amelogenin：X；CSF1PO：11，12；D13S317：12；D16S539：9，14；D18S51：17，18；D19S433：17，18；D21S11：28，30.2；D2S1338：19；D3S1358：5，16，17；D5S818：8，9；D7S820：11，12；D8S1179：12，13，14；FGA：21，22，23；TH01：7，9.3；TPOX：11；vWA：16，19，20；
同工酶
染色體 62~69

運(yùn)輸和保存：

SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞；293T培養(yǎng)視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

（1）SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞；293T培養(yǎng)細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題，細(xì)胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；

（2）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

（3）存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

（4）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開(kāi)封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；

（5）視具體情況而定。

（1）SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞；293T培養(yǎng)客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；

（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

（3）細(xì)胞狀態(tài)不好，未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；

（4）細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；

（5）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過(guò)度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格，我從10%-90%都用過(guò)，問(wèn)題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍”，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過(guò)夜，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

CD168/RHAMM  透明質(zhì)酸介導(dǎo)細(xì)胞游走受體抗體 0.1ml
M2-PK/PKM2  小鼠抗酸激酶-M2抗體 0.1ml
MKLP1  有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白樣1抗體 0.2ml
PLCZ1  磷酸肌醇磷脂酶PLCZ1抗體 0.1ml
ID1  DNA結(jié)合抑制因子1抗體 0.1ml
MCHR/GPR24  G蛋白偶聯(lián)受體24抗體 0.1ml
Mammaglobin A  乳腺珠蛋白1抗體 0.2ml
Insulin  胰島素抗體 0.1ml
LRP1/CD91  低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
BFSP2/Phakinin  晶狀體蛋白2抗體 0.2ml
Proteasome 19S S3  蛋白酶體PSMD3抗體 0.2ml
慶大霉素 英文名稱(chēng) 標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： 效價(jià)測(cè)定
粘菌素 英文名稱(chēng) 標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： 效價(jià)測(cè)定
利福霉素SV 英文名稱(chēng) 標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： 效價(jià)測(cè)定
阿米卡星 英文名稱(chēng) 標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： 效價(jià)測(cè)定
卷曲霉素 英文名稱(chēng) 標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： 效價(jià)測(cè)定
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞；293T培養(yǎng)麥迪霉素 英文名稱(chēng) 標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： 效價(jià)測(cè)定
去甲萬(wàn)古霉素 英文名稱(chēng) 標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： 效價(jià)測(cè)定
麥白霉素 英文名稱(chēng) 標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： 效價(jià)測(cè)定
妥布霉素 英文名稱(chēng) 標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： 效價(jià)測(cè)定
小諾霉素 英文名稱(chēng) 標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： 效價(jià)測(cè)定