穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞；293E價(jià)格視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過(guò)度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格，我從10%-90%都用過(guò)，問(wèn)題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍”，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過(guò)夜，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

phosphos-PCNA (Tyr211)  磷酸化增殖細(xì)胞核抗原抗體 0.1ml
PKC-γ/SCA14  蛋白激酶C亞型G抗體 0.2ml
CDKN3  細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制蛋白3抗體 0.2ml
Thioredoxin 2  線粒體硫氧還蛋白2抗體 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgG/PE  PE標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
phospho-PRKD1(Ser742)  磷酸化蛋白激酶C mu型抗體 0.1ml
CKLFH8/CMTM8  趨化素樣因子超家族成員8抗體 0.2ml
Phospho-MKK3(Ser189)/MKK6(Ser207)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗體 0.1ml
VHR/DUSP3  絲氨酸/蘇氨酸特定蛋酸酶抗體 0.2ml
ApoA4  載脂蛋白A4抗體 0.1ml
Rabbit Anti-Goat IgM/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
秦皮苷 英文名稱 白蠟樹(shù)苷  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： Fraxin
奇任醇 英文名稱 奇壬醇  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： Kirenol
高良姜素 英文名稱 3,5,7-三羥基黃酮  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： Galangin
穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞；293E價(jià)格比枯枯靈 英文名稱 畢扣扣靈堿；荷包牡丹堿；山烏龜堿  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： (+)-Bicuculline
三葉豆紫檀苷 英文名稱 紅車(chē)軸草根苷; 紅車(chē)軸草根甙；三葉豆根苷; 高麗槐素-D-葡萄糖  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： Trifolirhizin
異槲皮苷 英文名稱 異櫟素；羅布麻甲素；槲皮素-3-O-葡萄糖苷  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： Isoquercitrin
乙酰紫堇靈 英文名稱 乙酰紫堇醇靈堿  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： Acetylcorynoline
去氫二異丁香酚 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： Dehydrodiisoeugenol
奈苷 英文名稱 柰苷  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： Kaempferitrin
利卡靈-B 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： (-)-Licarin B

（1）穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞；293E價(jià)格細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題，細(xì)胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；

（2）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

（3）存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

（4）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開(kāi)封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；

（5）視具體情況而定。

（1）穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞；293E價(jià)格客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；

（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

（3）細(xì)胞狀態(tài)不好，未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；

（4）細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；

（5）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；