
細胞名稱
人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,13,15;D13S317:10;D16S539:10;D18S51:13;D19S433:14;D21S11:27,28,31;D2S1338:23,24;D3S1358:14,15;D5S818:11,12,13;D7S820:10,11,13;D8S1179:14,15;FGA:19,20,22.2;TH01:6,7;TPOX:8;vWA:17,20
同工酶
染色體
運輸和保存:
人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)培養(yǎng)視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)培養(yǎng)細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細胞復蘇后,絕大多數細胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細胞靜置24小時后,絕大多數細胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)培養(yǎng)客戶造成細胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細胞狀態(tài)不好,未細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細胞培養(yǎng)時經其它處理的,不重發(fā);
(5)細胞收到2天內,未告知,不重發(fā);
細胞特性:
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍”,傳統的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

TBX3 轉錄因子Tbx3抗體 0.2ml
phospho-RACGAP1(Ser387) 磷酸化Rho GTP酶激活蛋白GAP抗體 0.1ml
SCN8A/Nav1.6 鈉通道蛋白8α抗體 0.1ml
Hrasls3/HREV107 HRAS樣抑制因子3抗體 0.2ml
IL-17F/IL-24 白介素-17F抗體 0.2ml
CD10/CALLA/Neprilysin CD10抗體 0.1ml
Cadherin 8 鈣粘附蛋白8抗體 0.2ml
TNF alpha 腫瘤壞死因子-α/TNFα抗體 0.1ml
VAV1 鳥苷酸轉換因子VAV1抗體 0.2ml
AMPK alpha 1/PRKAA1 腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體 0.1ml
Polyprotein(Hepatitis G Virus) 庚型肝炎病毒多聚蛋白抗體 0.1ml
羥基酪醇 英文名稱 hydroxytyrosol 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥97%
茄尼醇 英文名稱 Solanesol 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: 98%
芹菜素 英文名稱 Apigenin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥98%
秦皮苷 英文名稱 Fraxin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥98%
人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)培養(yǎng)秦皮乙素 英文名稱 Aesculetin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥98%
秦皮甲素 英文名稱 Aesculin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥98%
秦皮素 英文名稱 Fraxetin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥98%
青藤堿 英文名稱 Sinomenine 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥98%
青蒿琥酯 英文名稱 Artesunate 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥98%
氫溴東莨菪堿 英文名稱 Scopolamine Hydrobromide 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: 97%