運(yùn)輸和保存:
人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]價(jià)格視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

細(xì)胞名稱(chēng)
人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]價(jià)格
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 早期報(bào)道中指出該細(xì)胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA,但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過(guò)對(duì)Ad5的插入點(diǎn)的克隆測(cè)序發(fā)現(xiàn),Ad5的1~4344位線(xiàn)性核苷酸整合入細(xì)胞染色體19q13.2。該細(xì)胞為人類(lèi)腺病毒載體擴(kuò)增的宿主。可表達(dá)異常的玻連蛋白的細(xì)胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。生物安全級(jí)別為2級(jí)。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:10~1:20傳代,每2~3天換液1次。
傳代情況 P20
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:7,12;D13S317:12;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D19S433:15,18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19;
同工酶
染色體
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過(guò)低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過(guò)度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格,我從10%-90%都用過(guò),問(wèn)題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長(zhǎng),-80度過(guò)夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

LATS2 腫瘤抑制基因LATS2抗體 0.2ml
ATF4/CREB-2 活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體 0.1ml
TNFSF13/CD256/APRIL 腫瘤壞死因子配體超家族成員13抗體 0.2ml
C21orf55/DnaJC28 21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框55抗體 0.2ml
BRSK1 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SAD-B抗體 0.2ml
HHV8/ORF50 人類(lèi)皰疹病毒8抗體 0.2ml
PLC beta 3 磷酯酶Cβ3抗體 0.1ml
DUSP1/MKP1 絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體 0.1ml
Phospho-Stat4 (Tyr693) 磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體 0.1ml
Chemerin/TIG2 視黃酸受體應(yīng)答蛋白2抗體 0.1ml
FECH/Ferrochelatase 鐵螯合酶抗體 0.2ml
蝥素 英文名稱(chēng) Cantharidin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
去甲蝥素 英文名稱(chēng) Norcantharidin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
植酸 英文名稱(chēng) Phytic acid 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
龍膽苦苷 英文名稱(chēng) gentiopicrin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
去氧膽酸 英文名稱(chēng) Deoxycholic acid 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]價(jià)格膽酸 英文名稱(chēng) Cholic acid 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
豬去氧膽酸 英文名稱(chēng) Hyodeoxycholic acid 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: UV≥98%
芝麻林素 英文名稱(chēng) Sesamolin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
芝麻素 英文名稱(chēng) Sesamin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
多巴 英文名稱(chēng) Levodopa 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: UV≥99%
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]價(jià)格細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開(kāi)封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問(wèn)題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]價(jià)格客戶(hù)造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶(hù)不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);