細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

COX4/COX IV-1  細胞色素c氧化酶IV亞型1抗體 0.2ml
BrdU  溴脫氧尿苷抗體 0.2ml
S100A6  S100鈣結合蛋白A6抗體 0.1ml
Phospho-Syk (Tyr525/526)  磷酸化非受體型酪氨酸蛋白激酶抗體 0.1ml
KLHL3  Kelch樣蛋白3抗體 0.2ml
Thrap3/TRAP150  甲狀腺激素受體相關蛋白3抗體 0.2ml
HCG/LH/FSH/TSH alpha  人絨毛膜促性腺激素α亞基抗體(Cg A) 0.1ml
phospho-ESPL1 (Ser1073)  磷酸化外紡錘體極樣蛋白1抗體 0.1ml
Clostridium perfringens type D  D型產氣莢膜梭菌抗體 1ml
SIRT1  沉默調節蛋白1抗體 0.1ml
C10orf81  10號染色體開放閱讀框81抗體 0.2ml
羅通定 英文名稱 四氫巴馬汀;延胡索乙素  規格:  20mg/支進口/國產 含量： Rotundine
落新婦苷 英文名稱   規格:  20mg/支進口/國產 含量： Astilbin
蘆丁 英文名稱 蕓香苷;蕓香葉苷;維生素P;蘆丁蕓香苷;蕓香甙  規格:  20mg/支進口/國產 含量： Rutin
雷公藤甲素 英文名稱 雷公藤內酯醇;雷公藤多甙  規格:  20mg/支進口/國產 含量： Triptolide
雷公藤內酯甲 英文名稱 雷公藤酯甲  規格:  20mg/支進口/國產 含量： Wilforlide A
人胚胎胰腺組織來源細胞；CCC-HPE-2說明書雷公藤乙素 英文名稱 雷公藤乙素;雷公藤羥內酯;雷公藤內酯二醇  規格:  20mg/支進口/國產 含量： Tripdiolide
雷公藤紅素 英文名稱 南蛇藤素  規格:  20mg/支進口/國產 含量： Celastrol
木犀草苷 英文名稱 木犀草素-7-O-葡萄糖苷;青蘭苷  規格:  20mg/支進口/國產 含量： Cynaroside
木犀草素 英文名稱 藤黃菌素  規格:  20mg/支進口/國產 含量： Luteolin
沒食子酸 英文名稱 3,4,5-三羥基苯甲  規格:  20mg/支進口/國產 含量： Gallic acid

第一種：

是凍存產品，由液氮直接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態影響較大，一旦細胞狀態不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。

第二種：

是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。

質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。

購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的細胞名稱、種屬、貨號、數量、協商細胞價格并預約發貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。