運(yùn)輸和保存:
人永生化表皮細(xì)胞;HaCaT價(jià)格視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

細(xì)胞名稱(chēng)
人永生化表皮細(xì)胞;HaCaT價(jià)格
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞源自一位62歲患有黑色素瘤男性的病灶外圍正常皮膚,角蛋白、角化細(xì)胞交聯(lián)外膜蛋白、中間絲相關(guān)蛋白陽(yáng)性。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 15%FBS
傳代方法 1:10~1:20傳代,每周換液2~3次
傳代情況 C2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:9,11;D13S317:10,12;D16S539:9,12;D18S51:12;D19S433:13,14;D21S11:30.2;D2S1338:17,25;D3S1358:16;D5S818:12;D7S820:9,11;D8S1179:14;FGA:24;TH01:9.3;TPOX:11,12;vWA:16,17,OL;
同工酶
染色體 72~88
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過(guò)低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過(guò)度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格,我從10%-90%都用過(guò),問(wèn)題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長(zhǎng),-80度過(guò)夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

Rabbit Anti-Avidin/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗親和素 0.1ml
SHFM3 SHFM3蛋白抗體 0.2ml
AMPK beta 2 腺苷單磷酸活化蛋白激酶β2抗體 0.2ml
Megsin 絲氨酸蛋白酶抑制劑B7抗體 0.2ml
Phospho-NFKB1(Thr932) 磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體 0.1ml
phospho-EGFR (Tyr1172) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 0.1ml
Mouse Anti-human IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗人IgG 0.1ml
Mouse Anti-Guinea pig IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
TSPAN3 四分子交聯(lián)體3抗體(四旋蛋白) 0.2ml
BOLA1 BOLA1蛋白抗體 0.2ml
MPO/c-ANCA 髓過(guò)氧化物酶抗體 0.1ml
氯磺隆 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):64902-72-3 100mg 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量:
氯酞酸甲酯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):1861-32-1 250mg 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量:
克氯得標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào): 84332-86-5 10mg 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量:
環(huán)蟲(chóng)酰肼標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào): 143807-66-3 1ml 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量:
克拉維酸鉀 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):100mg 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量:
人永生化表皮細(xì)胞;HaCaT價(jià)格吲哚酮草酯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):142891-20-1 100mg 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量:
醚磺隆 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):94593-91-6 100mg 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量:
克侖特羅標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào): 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量:
克拉維酸鋰 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):200mg 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量:
烯草酮 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào): 99129-21-2 100MG 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量:
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人永生化表皮細(xì)胞;HaCaT價(jià)格細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開(kāi)封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問(wèn)題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人永生化表皮細(xì)胞;HaCaT價(jià)格客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);