細(xì)胞名稱(chēng) 人胚肺成纖維細(xì)胞；HFL-I培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 正常胚胎肺成纖維細(xì)胞
培養(yǎng)條件 α－MEM：Alpha Minimum Essential Medium (with Nucleosides) 胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR Amelogenin:X,Y；CSF1PO:12,13；D13S317:8,9；D16S539:9,14；D18S51:13,16；D19S433:13,14；D21S11:29,30；D2S1338:18,24；D3S1358:14,15；D5S818:12；D7S820:11；D8S1179:10,12；FGA:18,22；TH01:6,7；TPOX:8,11；vWA:14,16
同工酶
染色體

運(yùn)輸和保存：

人胚肺成纖維細(xì)胞；HFL-I培養(yǎng)視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

（1）人胚肺成纖維細(xì)胞；HFL-I培養(yǎng)細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題，細(xì)胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；

（2）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

（3）存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

（4）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開(kāi)封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；

（5）視具體情況而定。

（1）人胚肺成纖維細(xì)胞；HFL-I培養(yǎng)客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；

（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

（3）細(xì)胞狀態(tài)不好，未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；

（4）細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；

（5）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過(guò)度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格，我從10%-90%都用過(guò)，問(wèn)題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍”，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過(guò)夜，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

TrK A/NTRK1  酪氨酸激酶A抗體 0.1ml
PBEF1(CT)  內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(C端抗體) 0.1ml
FASTKD5  Fas活化激酶結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 0.2ml
MAL/MPV17  T淋巴細(xì)胞成熟相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
IL-33/NFHEV  白介素33抗體 0.1ml
CD141/THBD  凝血調(diào)節(jié)蛋白/血栓調(diào)節(jié)素抗體 0.1ml
NCAM2  神經(jīng)細(xì)胞粘附分子2抗體 0.2ml
MAP1A  微管相關(guān)蛋白1A抗體 0.1ml
GFOD2  葡萄糖果糖還原酶2抗體 0.2ml
Importin 9/RanBP9  核蛋白9抗體（Ran結(jié)合蛋白M） 0.2ml
Phospho-HSL (Ser863)  磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體 0.1ml
硫酸甲酯 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：556-61-6 250mg 英文名稱(chēng)   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量：
甲基氫化潑尼松標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)： 83-43-2 100mg 英文名稱(chēng)   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量：
甲氧氯普胺 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：7232-21-5 10g 英文名稱(chēng)   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量：
異丙甲草胺 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：51218-45-2 100mg 英文名稱(chēng)   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量：
嗪草酮 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：21087-64-9 100MG 英文名稱(chēng)   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量：
人胚肺成纖維細(xì)胞；HFL-I培養(yǎng)苯氧菌胺 10ug/ml 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：133408-50-1 10ml 英文名稱(chēng)   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量：
甲氧磺草胺 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：139528-85-1 100MG 英文名稱(chēng)   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量：
速滅磷 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：7786-34-7 100MG 英文名稱(chēng)   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量：
甲磺隆 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：74223-64-6 100MG 英文名稱(chēng)   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量：
密滅汀 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：10ML 英文名稱(chēng)   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量：