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細(xì)胞名稱
人胚腎細(xì)胞;2V6.11說明書
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 這株細(xì)胞是2001年從人胚腎細(xì)胞株293衍化而來。293細(xì)胞用攜帶Zeocin-抗性標(biāo)記的質(zhì)粒pVgRXR轉(zhuǎn)染得到293pVgRXR細(xì)胞。 隨后, 用包含編碼E4 24K的Ad5 E4 ORF6基因的質(zhì)粒pEKORF6轉(zhuǎn)染。pEKORF6從包含潮霉素抗性基因的質(zhì)粒pIndHydro衍生而來。 載體包含SV40病毒序列。 2V6.11細(xì)胞株最初從含潮霉素的培養(yǎng)液中用克隆環(huán)分離單克隆得到。 2V6.11細(xì)胞誘導(dǎo)表達(dá)的人腺病毒E4 34KDa蛋白可通過免疫印跡法檢測。 這株細(xì)胞可以用作研究腺病毒E4癌基因的工具
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
UHRF1 核蛋白95抗體 0.2ml
Phospho-NR1D1(Ser55/59) 磷酸化細(xì)胞核受體Rev-Erbα抗體 0.1ml
Phospho-PAR4 (Thr163) 磷酸化蛋白酶活化受體4抗體 0.1ml
Pol II/RNA polymerase II RNA聚合酶II抗體 0.2ml
SERPIN A11 絲氨酸蛋白酶抑制劑A11抗體 0.2ml
BEND4/CCDC4 BEND4蛋白抗體 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml
OLIG1 少突膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子1 0.2ml
CDKN1B/P27kip1 P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑 0.1ml
Phospho-FGFR1 (Tyr766) 磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長因子受體1抗體 0.1ml
CRHR1/CRFR1 促腎上腺皮質(zhì)釋放激素受體1抗體 0.1ml
鄰氯青霉素標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 7081-44-9 250MG 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
粘菌素 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:1264-72-8 100mg 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
胺 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:420-04-2 100MG 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
草凈津 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:21725-46-2 250MG 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
環(huán)酰胺 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:113136-77-9 1ML 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
殺螟睛 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:2636-26-2 25MG 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
人胚腎細(xì)胞;2V6.11說明書霜唑 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:120116-88-3 100MG 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
擬除蟲菊酯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:63935-38-6 50MG 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
草滅特 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:1134-23-2 250MG 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
塞草酮 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:101205-02-1 100MG 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
細(xì)胞種類:
第一種:
是凍存產(chǎn)品,由液氮直接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運輸也對細(xì)胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實訂購的細(xì)胞名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實驗操作。