一步式PAGE染液產(chǎn)品及特點(diǎn)

本產(chǎn)品是目前最簡單的、靈敏度在納克級(jí)的蛋白質(zhì)PAGE染色方法。本產(chǎn)品不需要脫色處理，靈敏度高，使用方便，完全可以取代最常用的考馬斯亮藍(lán)G250（Coomassie Brilliant Blue G250） PAGE染色。

1. 一步染色，可以不需脫色，不必?fù)?dān)心脫色過度，一小時(shí)內(nèi)完成整個(gè)過程。

2. 高靈敏度，比考馬斯亮藍(lán)G250更靈敏，接近銀染，達(dá)到ng水平。

3. 不需昂貴儀器，肉眼即可觀察結(jié)果，不象其他納克級(jí)的染色方法需要貴重的儀器設(shè)備（如SYPRO系列的高靈敏度的熒光染料需要熒光成像系統(tǒng)）。

4. 與普通掃描儀，mass spectrometry等兼容，便于保存數(shù)據(jù)和后續(xù)處理。

5. 安全環(huán)保，不需要使用有毒的甲醇和有刺激味道的乙酸。

6. 即開即用，經(jīng)濟(jì)實(shí)惠，可以多次使用。

使用及效果

用去離子水簡單漂洗凝膠，然后將凝膠放入本產(chǎn)品中（1塊8×10 cm的 miniPAGE需要約25 mL的本產(chǎn)品），搖晃中染色直到出現(xiàn)滿意的帶型為止（一般需要20-60分鐘）。染色液可以重復(fù)使用數(shù)次。如果反復(fù)使用，本產(chǎn)品可以染8×10 cmmini PAGE約50塊。

一步式PAGE染液細(xì)菌的培養(yǎng)和收集：

將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時(shí)。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時(shí)至對(duì)數(shù)生長后期。

一步式PAGE染液質(zhì)粒DNA少量快速提取：

質(zhì)粒DNA小量提取法對(duì)于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點(diǎn)是簡便、快速，能同時(shí)處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　一步式PAGE染液（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機(jī)4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細(xì)菌碎片。

　　8、取20ml進(jìn)行電泳檢查。

XY120693溶液1mLXY60203硫酸新霉素干粉1gXY120695新生霉素溶液5mLXY120694制霉菌素溶液10mLXY120696土霉素鹽酸鹽溶液10mLXY120697青霉素G鉀鹽溶液1MuXY120698青霉素G鈉鹽溶10mLXY120699多粘菌素 B 硫酸鹽5mLXY100840嘌呤霉素干粉25mgXY120700利福平溶液10mLXY131232壯觀霉素溶液10mLXY120701鏈脲佐菌素溶液10mLXY60210硫酸鏈霉素溶液10mLXY60209鹽酸四環(huán)素溶液10mLXY120702衣霉素溶液1mLXY60301鹽酸四環(huán)素干粉1gXY120703鹽酸萬古霉素溶液10mL
探針標(biāo)記及檢測(cè)
XY90603隨機(jī)引物法DNA探針標(biāo)記試劑盒5次(A)XY90604PCR法DNA探針標(biāo)記試劑盒5次(A)XY90605TdT加尾法DNA探針標(biāo)記試劑盒5次(A)XY131036DNA 5’末端標(biāo)記試劑盒10次XY100210dNTP溶液(標(biāo)記專用)0.5mLXY100920生物素標(biāo)記dUTP溶液50μLXY100921地高辛標(biāo)記dUTP溶液25μLXY120631Aminoally-dUTP溶液100μL

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