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一站式長效期SDS-PAGE電泳套裝產(chǎn)品及特點
本產(chǎn)品是在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)套裝基礎上改良而得,主要改良的地方有兩處:一是配膠液的pH偏酸,二是將還原劑加入到電泳液中。這些改良使本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 偏酸的pH使PAGE膠比常規(guī)SDS-PAGE更加穩(wěn)定,便于配預制膠,增加實驗的可重復性。
2. 能降低蛋白質的脫氨反應和烷基化反應,也能阻止蛋白質的二硫鍵再生成。
3. 把還原劑整合到電泳液中,避免了蛋白質在電泳過程中重新形成二硫鍵,蛋白條帶比常規(guī)SDS-PAGE更加銳利。
4. 把分離膠和濃縮膠配膠液整合成一個,成分更簡單。
5. 更換電泳液即可用于不同大小的蛋白(A型電泳液適合30 kD以上蛋白,B型適合2-30 kD蛋白),不需要配制專門Tricine-SDS-PAGE,更加方便。
6. 即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
7. 安全,免去了實驗人員接觸粉末狀的劇毒物品丙烯酰胺。
8. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western雜交等實驗。
使用及效果
本產(chǎn)品使用同常規(guī)的SDS-PAGE電泳,詳見使用手冊。
一站式長效期SDS-PAGE電泳套裝細菌的培養(yǎng)和收集:
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時至對數(shù)生長后期。
一站式長效期SDS-PAGE電泳套裝質粒DNA少量快速提取:
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
一站式長效期SDS-PAGE電泳套裝(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY81206氨基黑染膜液250mLXY100924麗春紅S染膜液250mLXY100928濕法電轉液(干粉)20LXY81207半干法電轉液(干粉)20LXY100878Western印跡膜封膜液100mLXY81208印跡膜抗體稀釋液100mLXY80813Western印跡膜抗體清除劑50mL|200mLXY1008315-溴-4-氯-3-吲哚磷酸100mgXY100832四氮唑藍250mgXY81224BCIP/NBT顯色試劑盒100mLXY100214預混型BCIP/NBT溶液100mLXY81223增強型DAB顯色試劑盒100mLXY101106沉淀型TMB顯色試劑盒100mLXY91101一管式 TMB 顯色液100mL(A)XY120201超敏化學發(fā)光(HRP)檢測試劑盒25mL|250mLXY131192超敏化學發(fā)光(AP)檢測試劑盒25mLXY131142魯米諾1gXY131143AMPPD100mgXY131118乙烯乙二醇200mLXY131119HRP 穩(wěn)定劑/ 稀釋劑200mLXY130565β-Actin小鼠單抗30μLXY130566α-Actin小鼠單抗30μLXY130567β-Tubulin小鼠單抗30μLXY130568α-Tubulin小鼠單抗30μL
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