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辛甲基硫吡喃葡萄糖苷產品及特點
O T G 全名是1 - s - o c t y l - β - D -thioglucopyranoside(1-s- 辛基-β-D-硫吡喃葡萄糖苷),它是一種廣泛用于溶解膜蛋白的非離子型去垢劑。已發現在一些生物系統中,該產品不受β 半乳糖苷酶的影響。光學上透明并且可透析。與辛甲基β 葡糖苷的溶解能力相同,但穩定性更好。
常溫運輸和保存,有效期一年。
辛甲基硫吡喃葡萄糖苷細菌的培養和收集:
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
辛甲基硫吡喃葡萄糖苷質粒DNA少量快速提取:
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
辛甲基硫吡喃葡萄糖苷(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY83674 一管式病毒DNAOUT 50次|200次
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XY880921 96孔板病毒DNAOUT(離心法) 1次|5次
XY880101 一管式病毒DNA-RNAOUT 50次
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XY890607 柱式BAC DNAOUT 50次
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XY870903 一步法質粒 DNAOUT 2.0 50次|100次
XY880201 一步法無內毒素質粒DNAOUT 50次