E-64蛋白酶抑制劑溶液，20mg/mL產品及特點

E-64（N-[N-(L-3-trans-carboxyirane-2-carbonyl)-L-leucyl]-agmatine），分子量357.4，可溶解于DMSO或水中，pH2-10,活性穩定，強堿和強酸環境下失活。它是半胱氨酸蛋白酶(如木瓜酶，蛋白酶，組織蛋白酶B、L和H)的不可逆抑制劑。本產品為濃度為20mg/mL的甲醇/水（1:1（v/v））溶液，工作濃度為0.5-10μg/mL。

低溫運輸，-20℃保存，有效期三個月。

E-64蛋白酶抑制劑溶液，20mg/mL細菌的培養和收集：

將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。

E-64蛋白酶抑制劑溶液，20mg/mL質粒DNA少量快速提�。�

質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　E-64蛋白酶抑制劑溶液，20mg/mL（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。

　　8、取20ml進行電泳檢查。

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