α2巨球蛋白產(chǎn)品及特點

α2巨球蛋白（α2-macroglobulin,α2MG或AMG）是存在于脊椎動物血漿中的一種糖蛋白，也是血漿中分子量最大的蛋白質(zhì)，分子量約為65.2萬-80萬，具有廣譜的蛋白酶抑制活性，可以抑制大部分胞內(nèi)蛋白酶活性，但是不能抑制組織血管舒緩素、尿激酶、凝血因子Ⅻα、胞內(nèi)蛋白酶Lys-C。使用過程中應(yīng)避免添加DTT,DTT會導(dǎo)致α2巨球蛋白發(fā)生分解。它對酸敏感，pH4.0以下發(fā)生變性。活力單位定義：一個抑制單位Inh.U是指抑制9.1μg的胰蛋白酶活性的量。

低溫運輸，-20℃保存，有效期半年。

α2巨球蛋白細菌的培養(yǎng)和收集：

將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時至對數(shù)生長后期。

α2巨球蛋白質(zhì)粒DNA少量快速提取：

質(zhì)粒DNA小量提取法對于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　α2巨球蛋白（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。

　　8、取20ml進行電泳檢查。

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