Bradford法蛋白定量試劑盒產(chǎn)品及特點(diǎn)

Bradford法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度是最為常用的蛋白檢測(cè)方法之一，在酸性條件下，考馬斯亮藍(lán)（Coomassie G-250）染料能與蛋白質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物，其最大吸光值也由465 nm轉(zhuǎn)移到595 nm，通過顏色的強(qiáng)弱測(cè)定蛋白質(zhì)濃度的高低。此過程的示

意圖如下：

本產(chǎn)品是基于Bradford法蛋白檢測(cè)原理開發(fā)的產(chǎn)品，具備下述特點(diǎn)：

1. 快速，10-20個(gè)樣品只需要10分鐘即可完成測(cè)定。

2. 穩(wěn)定，加樣混勻后2 分鐘既可測(cè)定，1小時(shí)內(nèi)吸光度變化不超過10%。

3. 線性范圍在30-1000 μg/mL。

4. 最小測(cè)量體積為1-20 μL，最低測(cè)量蛋白量為0.5 μg。

5. 即開即用，不需要單獨(dú)購買每個(gè)成分再配制。

6. 有常規(guī)和微量?jī)煞N檢測(cè)模式。

7. 不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。巰基乙醇的濃度可高達(dá)1 M，二硫蘇糖醇的濃度可高達(dá)5 mM。

8. 但受略高濃度的表面活性劑影響，各種蛋白質(zhì)與染料的結(jié)合效率可能有差異。

使用及效果

將蛋白樣品和溶液A按4:1的比例充分混合，室溫放置5分鐘，測(cè)定595 nm的吸

光度。與BSA標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比即的樣品蛋白質(zhì)濃度。下圖是用本產(chǎn)品測(cè)定BSA和BGG

（牛血清γ-球蛋白）的結(jié)果圖。

Bradford法蛋白定量試劑盒細(xì)菌的培養(yǎng)和收集：

將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時(shí)。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時(shí)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)后期。

Bradford法蛋白定量試劑盒質(zhì)粒DNA少量快速提取：

質(zhì)粒DNA小量提取法對(duì)于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速，能同時(shí)處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　Bradford法蛋白定量試劑盒（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機(jī)4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細(xì)菌碎片。

　　8、取20ml進(jìn)行電泳檢查。

XY130896YPG液體培養(yǎng)基100mLXY130897YPDG液體培養(yǎng)基100mLXY130898MAL指示劑培養(yǎng)基100mLXY130899GAL指示劑培養(yǎng)基100mLXY130901酵母生產(chǎn)及產(chǎn)孢培養(yǎng)基100mLXY130902酵母產(chǎn)孢培養(yǎng)基100mLXY120517零誘導(dǎo)培養(yǎng)基100mLXY120688放線菌酮溶液1mLXY120680D溶液1mLXY120681可溶性兩性霉素B溶液1mLXY60206氨芐青霉素溶液10mLXY60101氨芐青霉素干粉1gXY120682桿菌肽溶液1mLXY120704博萊霉素溶液1mLXY120683羧芐青霉素鈉溶液1mLXY120684噻孢霉素溶液1mLXY120685先鋒霉素溶液1mLXY60102氯霉素干粉1gXY60207氯霉素溶液10mLXY120687環(huán)孢霉素A溶液1mLXY120686細(xì)胞松弛素B溶液0.1mLXY131234地塞米松溶液1mLXY120690紅霉素溶液10mLXY100838遺傳霉素(G418)干粉100mgXY100839潮霉素B干粉250mgXY120692硫酸慶大霉素溶液2mLXY60208硫酸卡那霉素溶液10mLXY60302硫酸卡那霉素干粉1gXY120693溶液1mL

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