糖蛋白染色試劑盒產(chǎn)品及特點(diǎn)

本產(chǎn)品為在SDS-PAGE 凝膠或蛋白免疫印跡膜上檢測糖蛋白的試劑盒。該方法使用三種試劑，所需時(shí)間僅需不到兩小時(shí)，而其他的染色方法需要四到五小時(shí)。染色后的糖蛋白為品紅色條帶，背景為淺粉色或者無色。它有如下特點(diǎn)：

1. 對糖蛋白的檢測靈敏度極高，如親和素和辣根過氧化物酶的檢出限分別為0.625納克及0.16 微克。

2. 包括一種陽性對照蛋白及一種陰性對照蛋白。

3. 簡潔、易儲存的試劑盒。

使用及效果

對糖蛋白進(jìn)行靈敏、特異的染色。利用相同的聚丙烯酰胺凝膠電泳相同的蛋白樣品，然后分別利用藍(lán)色染色試劑（圖A）及糖蛋白染色試劑盒（圖B）對兩塊凝膠進(jìn)行染色。在圖A 中所有的蛋白均被染色，而在圖B 中僅有含有不同量的糖鏈的蛋白被糖蛋白染色試劑染色。

糖蛋白染色試劑盒細(xì)菌的培養(yǎng)和收集：

將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時(shí)。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時(shí)至對數(shù)生長后期。

糖蛋白染色試劑盒質(zhì)粒DNA少量快速提取：

質(zhì)粒DNA小量提取法對于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點(diǎn)是簡便、快速，能同時(shí)處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　糖蛋白染色試劑盒（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機(jī)4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細(xì)菌碎片。

　　8、取20ml進(jìn)行電泳檢查。

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