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考馬斯亮藍R-250產(chǎn)品及特點
考馬斯亮藍R-250(Coomassie BrilliantBlue R-250) 是考馬斯亮藍系列染料中的一種。R 表示其干粉顏色是藍色偏紅,250 表示其純度。其鈉鹽的分子式是C45H44N3O7S2Na,分子量為826。在酸性條件下,染料的硫酸基團能跟蛋白的堿性氨基酸結(jié)合,故常用于主要用于SDS-PAGE染色。考馬斯亮藍R-250 比G-250 少兩個甲基基團,不能直接替換使用。
常溫運輸和保存,有效期一年。
考馬斯亮藍R-250細菌的培養(yǎng)和收集:
將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時至對數(shù)生長后期。
考馬斯亮藍R-250質(zhì)粒DNA少量快速提取:
質(zhì)粒DNA小量提取法對于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
考馬斯亮藍R-250(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY131187Acryl DNA助沉劑1mLXY131188彩色Acryl DNA助沉劑1gXY131189分子生物學級糖原干粉1gXY131190分子生物學級糖原溶液1mLXY50903微量核酸沉淀劑10mLXY60402超快非醇核酸沉淀劑30次|100次XY110801核酸濃縮劑30mLXY80204柱式RNA純化試劑盒50次XY90211低載量PCR片段純化試劑盒50次|100次XY90212高載量PCR片段純化試劑盒50次|100次XY100201海量PCR片段純化試劑盒5次XY8091996孔板PCR片段純化回收試劑盒(離心法)1次|5次XY60202柱式DNA膠回收試劑盒50次|100次XY90506膠回收及PCR片段純化兩用試劑盒50次|100次XY60706一管式DNA膠回收試劑30次|100次XY60601DNA UV防護劑3gXY70908DNA PAGE膠回收試劑盒30次|100次XY80202柱式DNA PAGE膠回收試盒50次XY80401柱式OLIGO回收試劑盒50次