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小鼠抗GST標簽單抗產(chǎn)品及特點
GST(谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶)分子量大小為26KD,是一個高度可溶的蛋白,可以利用它增加外援蛋白的可溶性和提高蛋白的表達量。GST融合表達系統(tǒng)廣泛應用于各種融合蛋白的表達,結(jié)合的蛋白可以在非變性條件下用還原型谷胱甘肽洗脫。本產(chǎn)品可用于檢測各種載體表達的GST標簽重組蛋白。本抗體具有下列特點:
克隆號: 3B10
抗體類型: Mouse IgG1
免疫原:全長GST蛋白
應 用: WB
建議濃度: 1:1000~1:10000
低溫運輸,-20℃保存,有效期兩年。
小鼠抗GST標簽單抗細菌的培養(yǎng)和收集:
將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時至對數(shù)生長后期。
小鼠抗GST標簽單抗質(zhì)粒DNA少量快速提取:
質(zhì)粒DNA小量提取法對于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
小鼠抗GST標簽單抗(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
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