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銷售商: 上海信裕生物工程有限公司 | 查看該公司所有產品 >> |
動物細胞核蛋白微量制備試劑盒產品及特點
DNA只存在于細胞核內,因此參與轉錄調節和DNA復制的蛋白質主要存在于細胞核中,要研究蛋白質與DNA的相互作用,首先需要制備能夠與DNA作用的天然細胞核蛋白質。目前、細胞核蛋白質制備方法一般都比較繁瑣,一次處理大量樣品時尤其不便,為此本公司開發了本產品,用于從哺乳動物組織和培養細胞核蛋白的微量提取,它具有下列特點:
1. 提取制備過程簡便,只需要一小時。
2. 實驗重復性好,尤其適合同時處理多個樣品。
3. 可用于培養的動物細胞,也可以用于組織細胞。
4. 制備的核蛋白能保持天然活性,可以直接用于轉錄因子活性分析、凝膠阻滯實驗(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、DNA足跡圖實驗甲基化干擾實驗酶活性測定等研究。
使用及效果
將培養到55%-65%覆蓋率的培養細胞用胰酶法處理后轉移到離心管中,離心30秒,在細胞沉淀中加入0.4 mL溶液A,懸浮后冰浴10分鐘,振蕩10分鐘,混勻后室溫離心10秒,在沉淀中加0.1 mL溶液B,冰浴20分鐘,4℃離心2分鐘,上清即使細胞核提取物,可以直接放-70℃保存或直接使用。
動物細胞核蛋白微量制備試劑盒細菌的培養和收集:
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
動物細胞核蛋白微量制備試劑盒質粒DNA少量快速提取:
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
動物細胞核蛋白微量制備試劑盒(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY120681可溶性兩性霉素B溶液1mLXY60206氨芐青霉素溶液10mLXY60101氨芐青霉素干粉1gXY120682桿菌肽溶液1mLXY120704博萊霉素溶液1mLXY120683羧芐青霉素鈉溶液1mLXY120684噻孢霉素溶液1mLXY120685先鋒霉素溶液1mLXY60102氯霉素干粉1gXY60207氯霉素溶液10mLXY120687環孢霉素A溶液1mLXY120686細胞松弛素B溶液0.1mLXY131234地塞米松溶液1mLXY120690紅霉素溶液10mLXY100838遺傳霉素(G418)干粉100mgXY100839潮霉素B干粉250mgXY120692硫酸慶大霉素溶液2mLXY60208硫酸卡那霉素溶液10mLXY60302硫酸卡那霉素干粉1gXY120693溶液1mLXY60203硫酸新霉素干粉1gXY120695新生霉素溶液5mLXY120694制霉菌素溶液10mLXY120696土霉素鹽酸鹽溶液10mLXY120697青霉素G鉀鹽溶液1MuXY120698青霉素G鈉鹽溶10mLXY120699多粘菌素 B 硫酸鹽5mLXY100840嘌呤霉素干粉25mgXY120700利福平溶液10mLXY131232壯觀霉素溶液10mL