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硫酸鏈霉素溶液,50mg/mL產(chǎn)品及特點(diǎn)
本產(chǎn)品為50 mg/mL的硫酸鏈霉素溶液,可以加入到細(xì)菌液體或固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)含抗性基因的細(xì)菌。1943年美國 S.A.瓦克斯曼從鏈霉菌中析離得到,是繼青霉素后第二個生產(chǎn)并用于臨床的抗生素。它的抗結(jié)核桿菌的特效作用,開創(chuàng)了結(jié)核病治療的新紀(jì)元。
高濃度的鏈霉素主要與細(xì)菌核糖體30S亞單位的S12結(jié)合,阻止甲硫氨酸-tRNA與核糖體30S亞單位結(jié)合,從而抑制蛋白質(zhì)合成的啟動。低濃度時,鏈霉素導(dǎo)致mRNA的錯讀。
抗性基因str 特異性表達(dá)一種蛋白酶,可修飾鏈霉素,抑制其與核糖體結(jié)合。低溫運(yùn)輸,4℃避光保存,有效期6個月。
硫酸鏈霉素溶液,50mg/mL細(xì)菌的培養(yǎng)和收集:
將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時至對數(shù)生長后期。
硫酸鏈霉素溶液,50mg/mL質(zhì)粒DNA少量快速提取:
質(zhì)粒DNA小量提取法對于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點(diǎn)是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
硫酸鏈霉素溶液,50mg/mL(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機(jī)4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細(xì)菌碎片。
8、取20ml進(jìn)行電泳檢查。
XY70503DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)50次XY111107DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)(2)50次XY90602DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)(3)50次XY120654Southern專用DNA Marker20次(A)|20次(B)XY90101大片段DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)50μgXY130960超螺旋DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)100uLXY70605miRNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)30次XY3120微量RNA助沉劑0.1mLXY131187Acryl DNA助沉劑1mLXY131188彩色Acryl DNA助沉劑1gXY131189分子生物學(xué)級糖原干粉1gXY131190分子生物學(xué)級糖原溶液1mLXY50903微量核酸沉淀劑10mLXY60402超快非醇核酸沉淀劑30次|100次XY110801核酸濃縮劑30mLXY80204柱式RNA純化試劑盒50次XY90211低載量PCR片段純化試劑盒50次|100次XY90212高載量PCR片段純化試劑盒50次|100次XY100201海量PCR片段純化試劑盒5次XY8091996孔板PCR片段純化回收試劑盒(離心法)1次|5次XY60202柱式DNA膠回收試劑盒50次|100次XY90506膠回收及PCR片段純化兩用試劑盒50次|100次