硫酸新霉素干粉產品及特點
本品為白色或類白色的粉末,極易引濕,水溶液顯右旋光性。在水中極易溶解,在乙醇、丙酮或氯仿中幾乎不溶。有毒。通過結合于70S核糖體亞基阻礙蛋白質合成。高濃度的新霉素可導致真菌細胞毒作用,這是由于它和真核線粒體核糖體(與原核核糖體相似)相互作用,與真核核糖體低親和力。
抗性基因aph 來于Tn5,編碼氨基糖苷磷酸轉移酶元,它使硫酸新霉素失活。
常溫運輸,4℃保存,有效期一年。
硫酸新霉素干粉細菌的培養和收集:
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
硫酸新霉素干粉質粒DNA少量快速提取:
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
硫酸新霉素干粉(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY131144山羊抗小鼠IgG(H+L),堿性磷酸酶標記100μLXY131145山羊抗兔IgG(Fc),堿性磷酸酶標記100μLXY131146山羊抗人IgG(H+L),堿性磷酸酶標記100μLXY131147山羊抗大鼠IgG(H+L),堿性磷酸酶標記100μLXY131148驢抗山羊IgG,堿性磷酸酶標記60μLXY131149山羊抗兔IgG(H+L),辣根過氧化物酶標記300μLXY131150山羊抗小鼠IgG(H+L),辣根過氧化物酶標記300μLXY131151山羊抗人IgG(H+L),辣根過氧化物酶標記300μLXY131152兔抗雞IgY,辣根過氧化物酶標記300μLXY131153驢抗山羊IgG,辣根過氧化物酶標記60μLXY131154山羊抗小鼠IgG,熒光素488標記0.1mgXY131155山羊抗小鼠IgG,熒光素555標記0.1mgXY131156山羊抗兔IgG,異硫氰酸熒光素標記0.1mgXY131157藻紅蛋白標記山羊抗兔IgG0.1mgXY131158熒光素488標記山羊抗兔IgG0.1mgXY131159熒光素555標記山羊抗兔IgG0.1mgXY131160異硫氰酸熒光素標記山羊抗小鼠IgG0.1mgXY131161山羊抗小鼠IgG,藻紅蛋白標記0.1mgXY100841β-巰基乙醇1.5mLXY100881SDS溶液(10%,電泳級)100mLXY90311電泳級Tricine干粉100gXY111007MALDI蛋白樣品處理試劑盒500次
工具酶