潮霉素B干粉產品及特點
無定形粉末。易溶于水、甲醇和乙醇, 幾乎不溶于低極性溶劑。熔點160~180℃。有催淚性和刺激性。蛋白質合成抑制劑,可干擾80S核糖體易位而造成翻譯錯譯。
抗性基因hph 特異性表達一種磷酸轉移酶,可催化多醇環(hyosamine)的4-羥基磷酸化,產生7-O-磷酸基-潮霉素B,后者在體內及體外均無生物活性。
常溫運輸、4℃避光保存、有效期一年。
潮霉素B干粉細菌的培養和收集:
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
潮霉素B干粉質粒DNA少量快速提取:
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
潮霉素B干粉(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY131080重組蛋白G1mgXY131081重組蛋白A/G1mgXY131082重組蛋白L1mgXY131075糖蛋白染色試劑盒10次XY131076磷酸蛋白染色試劑盒10次XY131077組氨酸標簽蛋白染色試劑盒10次XY80814Bradford法蛋白定量試劑盒100mL|200mLXY80815BCA法蛋白定量試劑盒500次XY80816超敏型BCA法蛋白定量試劑盒500次XY131069還原劑兼容型BCA蛋白定量試劑盒250次XY101102改良Lowry法蛋白定量試劑盒1000次XY80808蛋白酶抑制劑混合液2×0.5mLXY80809蛋白磷酸酶抑制劑混合液11mLXY130525蛋白磷酸酶抑制劑混合液25mLXY130526細菌專用蛋白酶抑制劑10mLXY130527哺乳動物專用蛋白酶抑制劑1mLXY130528植物專用蛋白酶抑制劑1mLXY130529酵母專用蛋白酶抑制劑5mLXY130530His標簽蛋白專用蛋白酶抑制劑10mLXY130531組織培養專用蛋白酶抑制劑1mLXY130543α2巨球蛋白25Inh.UXY130544AEBSF溶液5mLXY130534抗凝血酶Ⅲ溶液1mLXY130535APMSF溶液1mLXY100834胰蛋白酶抑制劑溶液10mLXY130536抑氨肽酶溶液5mLXY130537鈣蛋白酶抑制劑Ⅰ溶液10mLXY100538鈣蛋白酶抑制劑Ⅱ溶液10mL