干粉型SOC培養(yǎng)基產(chǎn)品及特點(diǎn)

SOC培養(yǎng)基全名是Super Optimal Brothwith Catabolic Repressor，它是由美國科學(xué)家Hanahan在1983年在SOB培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上開發(fā)的。主要用于轉(zhuǎn)化的熱激處理后恢復(fù)培養(yǎng)它含有20mM（0.36%）的Glucose，可以加強(qiáng)lac I的抑制，使外源蛋白在沒加誘導(dǎo)物時不表達(dá)，不對住宿主產(chǎn)生毒性。因此，轉(zhuǎn)化后恢復(fù)效果更佳。

常溫運(yùn)輸及保存，有效期兩年。

干粉型SOC培養(yǎng)基細(xì)菌的培養(yǎng)和收集：

將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時至對數(shù)生長后期。

干粉型SOC培養(yǎng)基質(zhì)粒DNA少量快速提取：

質(zhì)粒DNA小量提取法對于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點(diǎn)是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　干粉型SOC培養(yǎng)基（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機(jī)4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細(xì)菌碎片。

　　8、取20ml進(jìn)行電泳檢查。

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