超級培養基產品及特點
本產品是專門用于小規模高密度培養E.coli 液體培養基,使用本產品培養的細菌數量(按重量計算)比使用等體積的LB液體培養基高2-5倍,同樣細菌數量的情況下,質粒產量高2-3倍,可以廣泛用于質粒提取時細菌的培養。
1. 單位體積的細菌產量比LB高3-5倍(根據重量)。
2. 單位重量細菌的質粒產量比從LB得到的細菌高2-3倍(根據重量)。
3. 得到的質粒DNA和基因組DNA可以用于所有的分子生物學實驗。
4. 價格跟市場上的LB相當。
使用及效果
完全與LB液體培養基的使用一樣,只是由于細菌多,培養時要充分振蕩(最好300 rpm)以便于氧氣的供應。
備忘錄
細菌生長曲線及其特點
細菌生長一般分為以下四個階段:(1)延遲期:細胞分裂遲緩但代謝活躍。延遲期的長短與菌種、種齡、接種量和培養基有關。(2)對數期:細菌數以幾何級數增加,細菌數目的增加與原生質總量的增加,混濁度的增加呈正相關。(3)穩定期:新增殖的細胞數與老細胞的死亡數處于動態平衡。細胞開始積累貯藏物,如肝糖、異染顆粒、脂肪粒等,大多數芽孢細菌也在此階段形成芽孢。這一時期也是發酵過程積累代謝產物的重要階段,某些放線菌抗生素的大量形成也在此時期。(4)衰亡期:特點是細菌死亡率逐漸增加,以致死亡數大大超過新生數,群體中活菌數目急劇下降。
超級培養基細菌的培養和收集:
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
超級培養基質粒DNA少量快速提取:
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
超級培養基(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY001-50細胞周期與凋亡檢測試劑盒 Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit50 assaysQHK003-200高保真KOD試劑盒200UQHM030-50甲基化試劑盒50TXYT005-1Tunel細胞凋亡檢測試劑盒(FITC)10TXYP005-1Tunel細胞凋亡檢測試劑盒(POD)10T
PCR檢測試劑盒
XY001 新城疫凝膠PCR試劑盒 NDV 10次/盒
XY002 禽流感病毒H5凝膠PCR試劑盒 AIV-H5 10/40次
XY003 禽流感病毒H7N9凝膠PCR試劑盒 AIV-H7N9 10/40次
XY001 豬瘟凝膠PCR試劑盒 CSFV 10/40次
XY002 豬藍耳凝膠PCR試劑盒 PRRSV 10/40次
XY003 口蹄疫凝膠PCR試劑盒 FMDV 10/40次
XY001結核桿菌熒光定量PCR檢測試劑盒 TB40/96次