免質(zhì)粒提取篩選試劑盒產(chǎn)品及特點(diǎn)

本產(chǎn)品是基因在其自主開(kāi)發(fā)的一步式細(xì)菌裂解技術(shù)的基礎(chǔ)上開(kāi)發(fā)的超快質(zhì)粒篩選試劑，用單個(gè)菌落得到的裂解液直接上樣電泳，檢測(cè)細(xì)菌是否有質(zhì)粒或者質(zhì)粒是否有插入片段。其操作流程如下：

本產(chǎn)品具體特點(diǎn)如下：

1. 一步式裂解單個(gè)菌落，徹底釋放細(xì)胞內(nèi)的質(zhì)粒，不需要過(guò)夜培養(yǎng)細(xì)菌。

2. 直接使用單菌落裂解液電泳，免去繁瑣的質(zhì)粒提取步驟。

3. 電泳結(jié)果可用于快速判斷細(xì)菌是否有質(zhì)粒、質(zhì)粒是否有插入片段（需要空載體做對(duì)照，同時(shí)插入片段需要足夠大）、插入片段長(zhǎng)度估計(jì)、快速PCR模板制備等。

4. 適用于高拷貝和中拷貝質(zhì)粒。

使用及效果

將1個(gè)直經(jīng)為2-5 mm的新鮮過(guò)夜培養(yǎng)得到的菌落轉(zhuǎn)移到15 uL溶液A中，充分吹打混勻，加入15 uL溶液B，振蕩混勻后室溫12，000-15，000g離心1分鐘，直接取10 uL上清液電泳。裂解液稀釋后也可以作為PCR模板。

免質(zhì)粒提取篩選試劑盒細(xì)菌的培養(yǎng)和收集：

將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時(shí)。用無(wú)菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時(shí)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)后期。

免質(zhì)粒提取篩選試劑盒質(zhì)粒DNA少量快速提取：

質(zhì)粒DNA小量提取法對(duì)于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速，能同時(shí)處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　免質(zhì)粒提取篩選試劑盒（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機(jī)4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無(wú)菌牙簽從eppendorf管中去除細(xì)菌碎片。

　　8、取20ml進(jìn)行電泳檢查。

XY131012螢火蟲(chóng)熒光素1mLXY131019無(wú)內(nèi)毒素螢火蟲(chóng)熒光素25mgXY130599β-半乳糖苷酶活性檢測(cè)試劑盒300次XY130802ADP/ATP發(fā)光法細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒200次XY130801ATP發(fā)光法細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒200次XY121104增強(qiáng)型天狼猩紅染色試劑盒100mLXY121105茜素紅S染色試劑盒100mLXY130822蘇木素染色液15ml
細(xì)胞試劑盒
XY008-2細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒(標(biāo)準(zhǔn)型) Cell Counting Kit-8100次QHE002-100ECL 高靈敏ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒(高靈敏型)50ml/50mlQHP001-3Protein A+G Sepharose Beads2ml(50%slurry)XY002-2Annexin V-EGFP/PI雙染法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒20 assaysXY003-2Annexin V-RFP細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒20 assaysXY005-2Annexin V-FITC/PI雙染法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒20 assaysQHT003-2TransAid 2000 Transfection Reagent 轉(zhuǎn)染試劑0.75ml

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