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IPTG干粉產(chǎn)品及特點
IPTG學(xué)名為異丙基-β-D-硫代半乳糖苷;分子式為C9H8O5S,分子量為238.31,CAS號為367-93-1。本產(chǎn)品為白色或類白色結(jié)晶。溶于水和乙醇。
低溫運輸、-20℃保存、有效期兩年。
IPTG干粉細(xì)菌的培養(yǎng)和收集:
將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時至對數(shù)生長后期。
IPTG干粉質(zhì)粒DNA少量快速提取:
質(zhì)粒DNA小量提取法對于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
IPTG干粉(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機(jī)4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細(xì)菌碎片。
8、取20ml進(jìn)行電泳檢查。
XY90603隨機(jī)引物法DNA探針標(biāo)記試劑盒5次(A)XY90604PCR法DNA探針標(biāo)記試劑盒5次(A)XY90605TdT加尾法DNA探針標(biāo)記試劑盒5次(A)XY131036DNA 5’末端標(biāo)記試劑盒10次XY100210dNTP溶液(標(biāo)記專用)0.5mLXY100920生物素標(biāo)記dUTP溶液50μLXY100921地高辛標(biāo)記dUTP溶液25μLXY120631Aminoally-dUTP溶液100μLXY120630Fluorescein -12- dUTP溶液25μLXY130995Cy3-dCTP溶液25μLXY130996Cy5-dCTP溶液25μLXY121122柱式探針純化試劑盒10次XY121110超快核酸轉(zhuǎn)膜試劑盒5次(A)|5次(B)XY70104核酸印跡膜染液100mLXY80915超級雜交液100mL(A)|100mL(B)XY130904超級雜交液(Oligo探針)10mLXY130905超級雜交液(芯片)10mLXY130906超級雜交液(原位雜交)10mLXY131208DNA探針變性液10mLXY100405SSC溶液,20×100mL