克必隆常態轉化液產品及特點
克必隆常態轉化液是最新推出的具有自主知識產權的革命性產品，它能使各種常態的E.coli 細胞直接用于快速轉化實驗，使廣大用戶不再因為簡單的轉化實驗而再為感受態細胞的制備，保存和運輸等繁瑣的事情而操心，大大地縮短了基因克隆實驗的時間，提高使用者的工作效率。
1. 不需專門制備感受態細胞，直接使用常態的細胞進行質粒轉化，隨用隨配，十分方便。常態細胞包括新鮮培養的菌液，新鮮的或4℃放置數月的培養基菌落，甘油菌種保存液等。
2. 適用菌種和質粒廣泛，用過的E.coli 菌種包括K12系的DH5α和Tg1，B系的BL21（DE3）。用過的質粒有pGEM，pET和克必隆系列等。
3. 轉化效率適中，使用10 ng質粒轉化一般能得到上萬個轉化子）效率在105到106 CFU/μg質粒之間），使用3-5 μL連接液轉化一般能得幾千個轉化子，足夠篩選重組子使用（但不適合構建文庫）。
4. 單管快速操作，整個操作可以在一個1.5 mL塑料離心管中進行，最短可以在三十分鐘內完成，不需要過夜細菌培養，熱休克處理甚至恒溫搖床，極其適用于自動化的大規模克隆篩選工作。
5. 穩定性好，本可以在-20℃條件下長期保存而不用擔心轉化效率的降低，而感受態細胞在同樣條件下會迅速失去活性。
使用及效果
將數個E.coli 菌落（或50 μ L甘油菌種液，100 μ L新鮮培養液）轉入裝有1 mL液體培養基的1.5 mL塑料離心管中，37℃水浴1小時，室溫10000 g離心1分鐘后去盡上清，加入轉化液和1-10 μ L連接反應液，輕柔混勻，-20℃放置致凝，冰浴5分鐘，加入1 mL 液體培養基，37℃水浴1小時，取0.1-0.3 mL涂于含相關抗菌素的固體培養基上，37℃過夜培養后即得轉化菌落。
克必隆常態轉化液細菌的培養和收集：
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
克必隆常態轉化液質粒DNA少量快速提取：
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
克必隆常態轉化液（一）、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。
2、棄上清，將管倒置于衛生紙上幾分鐘，使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY80910X-Gal溶液10mLXY70803免質粒提取篩選試劑盒1000次XY60404超級培養基100mLXY100602干粉型LB培養基250gXY100820干粉型LB-Lennox培養基250gXY100821干粉型2×YT培養基250gXY100822干粉型SB培養基250gXY100813干粉型SOB培養基250gXY100823干粉型SOC培養基250gXY100825自誘導培養基(lac啟動子)200mLXY100824干粉型TB培養基250gXY100826穿刺培養基10管XY100827菌種保存液10管(A)|10管(B)XY130895YPD液體培養基100mLXY130896YPG液體培養基100mLXY130897YPDG液體培養基100mLXY130898MAL指示劑培養基100mLXY130899GAL指示劑培養基100mLXY130901酵母生產及產孢培養基100mLXY130902酵母產孢培養基100mLXY120517零誘導培養基100mLXY120688放線菌酮溶液1mLXY120680D溶液1mLXY120681可溶性兩性霉素B溶液1mLXY60206氨芐青霉素溶液10mLXY60101氨芐青霉素干粉1gXY120682桿菌肽溶液1mL
