GS200酵母菌種產品及特點

本產品為GS200畢赤酵母菌株。

其基因型如下：

arg4 his4

低溫運輸，-80℃保存，有效期一年。

C r e g g , J . M . , B a r r i n g e r , K . J . ,Hessler, A.Y., Madden, K.R. (1985)Pichia pastoris as a host system fortransformations. Mol. Cell. Biol. 5,3376–3385.

GS200酵母菌種細菌的培養和收集：

將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。

GS200酵母菌種質粒DNA少量快速提取：

質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　GS200酵母菌種（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。

　　8、取20ml進行電泳檢查。

XY131157藻紅蛋白標記山羊抗兔IgG0.1mgXY131158熒光素488標記山羊抗兔IgG0.1mgXY131159熒光素555標記山羊抗兔IgG0.1mgXY131160異硫氰酸熒光素標記山羊抗小鼠IgG0.1mgXY131161山羊抗小鼠IgG，藻紅蛋白標記0.1mgXY100841β-巰基乙醇1.5mLXY100881SDS溶液(10%,電泳級)100mLXY90311電泳級Tricine干粉100gXY111007MALDI蛋白樣品處理試劑盒500次
工具酶
XY51206Taq DNA聚合酶500U|5000UXY120401熱啟動Taq DNA聚合酶100UXY130606抗干擾Taq DNA 聚合酶100次XY130910Long-Taq DNA聚合酶500UXY90501Tth DNA聚合酶250UXY51207Pfu DNA聚合酶100UXY130429Phusion DNA聚合酶250UXY101002KOD DNA聚合酶250UXY131037Tfl DNA聚合酶100UXY130430E.coli DNA聚合酶 Ι500UXY100937φ29 DNA聚合酶250U

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