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BS168枯草宿主菌菌種產品及特點
BS168菌株是由X射線輻射而來的菌株,Spizizen于1958年發現枯草桿菌168菌株為可轉化菌株,含紅霉素抗性,其基因組測序已完成。轉化方法完善、便捷,含有多種蛋白酶。金黃色葡萄球菌帶有抗性基因的質粒可作為其載體,菌株沒有致病性。
其基因型如下:
Erm
低溫運輸,-80℃保存,有效期一年。
BS168枯草宿主菌菌種細菌的培養和收集:
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
BS168枯草宿主菌菌種質粒DNA少量快速提取:
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
BS168枯草宿主菌菌種(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY130521 鏈霉親和素磁珠 2mL
XY3090 固相RNase清除劑 100mL|250mL
XY130983 氣相RNase清除劑 120mL
XY3091 液相RNase清除劑 1.5mL
XY3110 氧釩核糖核苷復合物 10mL
XY3100 RNA長效保存液 1.5mL
XY3290 RNase抑制劑(人源) 400U|2500U
XY130699 RNase 抑制劑(小鼠源) 3000U
XY60201 非酶DNA清除劑 1.5mL
XY70801 非酶DNA清除劑-2 15次
XY90318 柱式DNA清除劑 50次
XY90802 大提柱式DNA清除劑 5次
XY90903 無RNase的DNase溶液 300U
XY90904 膜結合DNA清除試劑盒 50次
XY60204 非酶多糖清除劑(RNA專用) 10mL