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Turbo菌種產(chǎn)品及特點(diǎn)
本產(chǎn)品為大腸桿菌Turbo 菌株,該菌株缺失非特異性核酸內(nèi)切酶I(endA1)活性,具有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)谋磉_(dá)調(diào)控功能(lacIq)。可用于制備高質(zhì)量質(zhì)粒,可做藍(lán)/ 白斑篩選,可用于克隆毒性基因。
其基因型如下:
F´ pro A+B+ lac Iq Δlac ZM15/fhu A2Δ(lac -pro AB) gln V gal R(zgb -210::Tn10)Tets end A1 thi-1 Δ(hsd S-mcr B)5
低溫運(yùn)輸,-80℃保存,有效期一年。
Turbo菌種細(xì)菌的培養(yǎng)和收集:
將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時(shí)。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時(shí)至對數(shù)生長后期。
Turbo菌種質(zhì)粒DNA少量快速提取:
質(zhì)粒DNA小量提取法對于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點(diǎn)是簡便、快速,能同時(shí)處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
Turbo菌種(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機(jī)4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細(xì)菌碎片。
8、取20ml進(jìn)行電泳檢查。
XY4201 THERMOscript One Step qRT-PCR Kit(一步法熒光定量耐熱反轉(zhuǎn)錄PCR試劑盒) 50次×50μl/100次×50μl
XY3501 快速植物DNA提取擴(kuò)增套裝 50次/100次/200次
XY1701 TUREscript H Minus M-MuLV Reverse Transcriptase(反轉(zhuǎn)錄酶) 5000U/10000U/10000U×5
XY4301 THERMOscript H Minus M-MuLV RTase(耐熱反轉(zhuǎn)錄酶) 5000U/10000U
XY1801 TUREscript 1st Strand cDNA (第一鏈反轉(zhuǎn)錄試劑盒) 25次/50次
XY4401 THERMOscript 1st Strand cDNA Synthesis Kit(第一鏈耐熱反轉(zhuǎn)錄試劑盒) 25次/50次
XY3401 TUREscript One Step RT-PCR Kit(一步法反轉(zhuǎn)錄PCR試劑盒) 50次×50μl/100次×50μl
XY4501 THERMOscript One Step RT-PCR Kit(一步法耐熱反轉(zhuǎn)錄PCR試劑盒) 50次×50μl/100次×50μl
XY4801 miRNA cDNA 第一鏈合成試劑盒 25次
XY4901 miRNA 熒光定量PCR檢測試劑盒 50次×50μl