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Tuner(DE3)菌種產品及特點
Tuner系列菌株是LacZY去除的BL21突變菌株,這可以通過細胞培養來調節蛋白表達水平。Tuner系列菌株是lon和ompT蛋白酶缺陷型菌株。
Tuner(DE3)菌株的蛋白表達水平可以通過IPTG濃度進行精確的調節,具有嚴格的濃度依賴性。Tuner(DE3)菌株含有的DE3是溶源性的 λDE3,在lacUV5啟動子下攜帶有T7 RNA聚合酶的染色體拷貝。該菌株適用于pET系列載體及其他T7啟動子系列載體。
其基因型如下:
F-omp T hsd SB(rB-mB-) gal dcm lac Y1(DE3)
低溫運輸,-80℃保存,有效期一年。
Tuner(DE3)菌種細菌的培養和收集:
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
Tuner(DE3)菌種質粒DNA少量快速提。
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
Tuner(DE3)菌種(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY1701 選擇性凋亡DNA Ladder抽提試劑盒 25次/50次
XY1801 凋亡小體/hoeschst染色試劑盒 100次
XY1901 Annexin V-FITC凋亡檢測試劑盒 25次/50次
XY3901 唾液DNA收集保存運輸提取試劑盒 2ml×10次/2ml×50次
XY2101 M13噬菌體單鏈基因組DNA快速提取試劑盒 50次/100次
XY2201 λ噬菌體基因組DNA快速提取試劑盒 50次/100次
XY2701 SoilPure超純土壤基因組DNA快速提取試劑盒 50次
XY2301 糞便基因組DNA快速提取試劑盒 50次
XY4001 病毒基因組DNA快速提取試劑盒 50次
XY2501 微量/臨床樣品基因組DNA快速提取試劑盒 50次
XY3001 口腔/咽拭子基因組DNA快速提取試劑盒 50次