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ScarabXpress T7lac 菌種產(chǎn)品及特點(diǎn)
ScarabXpress T7lac 菌株是在MDS 42multiple-deletion strain菌株的基因組DNA中整合了一個(gè)由lac promoter控制的T7 RNA聚合酶基因,適用于表達(dá)由T7啟動(dòng)子控制的外源基因,常見的pET質(zhì)粒都可以在本產(chǎn)品中得到表達(dá)。
ScarabXpress T7lac 菌株作為分子生物學(xué)研究的菌種,具有下列好處:超強(qiáng)的基因組穩(wěn)定性,可用作克隆的宿主菌,尤其是克隆常規(guī)菌種難以克隆的片段;高質(zhì)粒轉(zhuǎn)化效率;更有效的生長效率,可以用于大規(guī)模制備質(zhì)粒,重組蛋白和其他細(xì)菌代謝產(chǎn)物(如氨基酸);對(duì)T1噬菌體免疫。
低溫運(yùn)輸,-80℃保存,有效期一年。
ScarabXpress T7lac 菌種細(xì)菌的培養(yǎng)和收集:
將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時(shí)。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時(shí)至對(duì)數(shù)生長后期。
ScarabXpress T7lac 菌種質(zhì)粒DNA少量快速提取:
質(zhì)粒DNA小量提取法對(duì)于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點(diǎn)是簡便、快速,能同時(shí)處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
ScarabXpress T7lac 菌種(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機(jī)4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細(xì)菌碎片。
8、取20ml進(jìn)行電泳檢查。
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