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Rosetta-gami B(DE3)plysS菌種產品及特點
Rosetta-gami B(DE3)系列菌株來源于Origami B系列菌株,攜帶有TrxB和Gor基因突變,集合了BL21系列,Rosetta系列菌株和Origami系列菌株的優點,極大增強了細胞內二硫鍵的形成和含有在大腸桿菌中稀有密碼子的真核細胞蛋白的表達能力。R o s e t t a - g a m i B ( D E 3 ) p l y s S 來源于Rosetta-gami B(DE3)菌株,含有pRARE質粒,包含稀有密碼子;含有BL21系列菌株中的lacZY基因突變,能夠通過IPTG高效控制目的基因的表達;含有溶源性的 λDE3,帶有T7 RNA聚合酶的染色體拷貝;含有pLySs質粒,能夠產生T7溶菌酶,可以有效降低目的基因的基礎表達水平。pLySs質粒能夠和pUC-及pBR322-衍生的質粒互相共存。
其基因型如下:
F – o m p T h s d S B ( r B–mB–) g a l d c mlacY1 aphC (DE3) gor522 ::Tn10 trxBplysSRARE (CamR, KanR, TetR)
低溫運輸,-80℃保存,有效期一年。
Rosetta-gami B(DE3)plysS菌種細菌的培養和收集:
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
Rosetta-gami B(DE3)plysS菌種質粒DNA少量快速提取:
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
Rosetta-gami B(DE3)plysS菌種(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY8130928 紅細胞裂解液C型(核酸純化) 100mL
XY8130989 白細胞裂解液 100mL
XY880603 微型離心管專用研磨杵 50只(A)|50套(B)
XY83670 動物DNAOUT 100mL|250mL
XY871206 柱式動物DNAOUT 50次
XY8130433 磁珠動物DNAOUT 50次
XY8120655 Southern級動物DNAOUT 5次
XY880923 大提柱式動物DNAOUT 4次
XY8101111 柱式軟體動物DNAOUT 50次
XY881101 柱式昆蟲DNAOUT 50次
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XY860306 柱式血液DNAOUT 50次|200次
XY8130509 磁珠血液DNAOUT 100次
XY8120522 柱式血液DNA-RNAOUT 50次
XY8120202 血液保存和DNA純化套裝 100次
XY880924 大提柱式血液DNAOUT 4次
XY880920 96孔板血液DNAOUT(離心法) 1次|5次
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