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Rosetta-gami(DE3)plysS菌種產品及特點
Rosetta-gami(DE3)pLysS菌株來源于Rosetta-gami(DE3)菌株,同時集合了Origami(DE3)和Rosetta(DE3)的優點,除具有Rosetta-gami(DE3)菌株的有點外,還含有pLySs質粒。pLySs質粒能夠產生T7溶菌酶,可以有效降低目的基因的基礎表達水平。pLySs質粒的起始復制位點是p15 Origin, 這使得該質粒能夠和pUC-及pBR322-衍生的質;ハ喙泊。
Rosetta-gami(DE3)pLysS細胞同時具有氯霉素,卡那,鏈霉素和四環素四種抗生素抗性,被建議使用于含有Bla標記的氨芐抗性表達質粒。適用于pET系列載體及其他T7啟動子系列載體。其基因型如下:
Δ(ara–leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuIIphoR araD139 ahpC galE galK rpsL(DE3) F’[lac+ lacIq pro ] gor522 ::Tn10trxB plysSRARE (CamR,KanR StrR, TetR)
低溫運輸,-80℃保存,有效期一年。
Rosetta-gami(DE3)plysS菌種細菌的培養和收集:
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
Rosetta-gami(DE3)plysS菌種質粒DNA少量快速提。
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
Rosetta-gami(DE3)plysS菌種(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY024 玉米Bt11/Total Plant DNA RT-PCR檢測試劑盒 40次/盒
XY025 玉米MON810/MS RT-PCR檢測試劑盒 40次/盒
XY026 玉米MON810/Total Plant DNA RT-PCR檢測試劑盒 40次/盒
XY027 玉米GA21/MS RT-PCR檢測試劑盒 40次/盒
XY028 玉米GA21/Total Plant DNA RT-PCR檢測試劑盒 40次/盒
XY029 大米Bt63 RT-PCR檢測試劑盒 40次/盒
XY030 大米Cry1Ac RT-PCR檢測試劑盒 40次/盒
XY101104 3'-RACE試劑盒 10次
XY101105 5'-RACE試劑盒 10次
XY130412 eTS 核心試劑盒 10次
XY130702 p19 siRNA 結合蛋白 1000U
XY130703 p19 miRNA 檢測試劑盒 100次
XY131039 即用型EMSA試劑盒 100次
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