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Origami(DE3)plysS菌種產品及特點
Origami系列菌株是K-12細胞的衍生菌,在trxB和gor基因上同時含有突變,這使得該菌株能夠更加高效的在細胞質內生成二硫鍵,有助于含二硫鍵蛋白的活性蛋白形成。Origami系列菌株的感受態細胞能夠用于氨芐抗性質粒的蛋白表達,尤其是和pET32a載體能夠完美搭配使用。pET32a載體含有thioredoxin(TRX)融合標簽,能夠高效提升胞質內蛋白二硫鍵的形成。DE3是溶源性的λDE3,在lacUV5啟動子下攜帶有T7 RNA聚合酶的染色體拷貝。該菌株適用于pET系列載體及其他T7啟動子系列載體。菌株含有的pLSs質粒能夠產生T7溶菌酶,可以有效降低目的基因的基礎表達水平。pLySs質粒使得該菌株具有氯霉素抗性。pLySs質粒的起始復制位點是p15 Origin, 這使得該質粒能夠和pUC-及pBR322-衍生的質粒互相共存。
其基因型如下:
Δ(ara –leu )7697 Δlac X74 Δpho A Pvu IIpho R ara D139 ahp C gal E gal K rps LF[lac +lac Iq pro ] (DE3) gor 522::Tn10trx B plysS(CamR,KanR,StrR,TetR)
低溫運輸,-80℃保存,有效期一年。
Origami(DE3)plysS菌種細菌的培養和收集:
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
Origami(DE3)plysS菌種質粒DNA少量快速提取:
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
Origami(DE3)plysS菌種(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY025 金黃色葡萄球PCR試劑盒 40次/盒
XY026 霍亂弧PCR試劑盒 40次/盒
XY027 副溶血弧PCR試劑盒 40次/盒
XY028 大腸埃希O157:H7PCR試劑盒 40次/盒
XY029 產毒副溶血弧PCR試劑盒 40次/盒
XY031 空腸彎曲菌熒PCR檢測試劑盒 40次/盒
XY032 蠟樣芽孢桿PCR試劑盒 40次/盒
XY033 副傷寒桿PCR試劑盒 40次/盒
XY034 傷寒桿PCR試劑盒 40次/盒
XY035 炭疽桿PCR試劑盒(分別有檢Capa/Rob/PAG的試劑盒) 40次/盒
XY036 豬鏈球菌熒PCR試劑盒 40次/盒
XY037A 諾沃克病毒通用PCR試劑盒 40次/盒
XY037B 諾沃克病G1G2雙重分PCR試劑盒 40次/盒
XY038 痢疾桿PCR試劑盒 40次/盒
XY039 小腸耶爾森PCR試劑盒 40次/盒
XY040 創傷弧菌實時熒qPCR檢測試劑盒 48次/盒
XY041 溶藻弧菌實時熒qPCR檢測試劑盒 48次/盒