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MDS E.coli 菌種產品及特點背景資料
MDS E. coli 菌種是指用MDS(Multiple DeletionS e r i e s , 多位點敲除) 技術去除掉E . c o l i K 1 2 系的MG1655菌種4.6Mb基因組中15%非關鍵DNA后得到的新菌種,其基因組只有3.7 Mb。去除掉的DNA包括:
1. 所有轉座子(引起突變和DNA重組的原因之一)。
2. K-島(只在E. coli K12菌種中存在,在其他E. coli 菌種中沒有的部分。可能來源于非E. coli 生物)。
3. 大量的非必須基因。
4. 潛在致病基因。
5. 垃圾DNA。
MDS菌種作為分子生物學研究的菌種,具有下列好處:
1. 超強的基因組穩定性,可用作克隆的宿主菌,尤其是克隆常規菌種難以克隆的片段。
2. 高質粒轉化效率。
3. 更有效的生長效率,可以用于大規模制備質粒,重組蛋白和其他細菌代謝產物(如氨基酸)。
4. 對T1噬菌體免疫。
MDS E.coli 菌種細菌的培養和收集:
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
MDS E.coli 菌種質粒DNA少量快速提取:
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
MDS E.coli 菌種(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY012 嗜肺軍團菌核酸熒光PCR檢測試劑盒 48
XY013 結核分枝桿菌核酸熒光PCR檢測試劑盒 48
XY014 嗜麥芽窄食單胞菌核酸熒光PCR檢測試劑盒 48
XY015 鮑曼不動桿菌核酸熒光PCR檢測試劑盒 48
XY016 洋蔥伯克霍爾德菌核酸熒光PCR檢測試劑盒 48
XY017 超廣譜β-內酰胺酶(ESBL)肺炎克雷伯菌核酸熒光PCR檢測試劑盒 48
XY018 超廣譜β-內酰胺酶(ESBL)大腸埃希菌核酸熒光PCR檢測試劑盒 48
XY019 肺炎支原體/肺炎衣原體雙色核酸熒光PCR檢測試劑盒 48
XY020 銅綠假單胞菌/肺炎克雷伯菌雙色核酸熒光PCR檢測試劑盒 48
XY021 A組鏈球菌/金黃色葡萄球菌雙色核酸熒光PCR檢測試劑盒 48
XY022 流感嗜血桿菌/肺炎鏈球菌雙色核酸熒光PCR檢測試劑盒 48
XY023 金黃色葡萄球菌毒性休克綜合征毒素(TSST-1)/殺白細胞素(PVL)雙色核酸熒光PCR檢測試劑盒 48
XY024 金黃色葡萄球菌腸毒素A(SEA)/B(SEB)雙色核酸熒光PCR檢測試劑盒 48
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